为什么pCR三次复制得到目的基因长度
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/10 20:20:30
根据目的基因设计引物,然后进行PCR,如果有扩增产物,不就表明含有目的基因,如果没有的话,就表明没有成功转入目的基因.再问:可是题中有这么一句话:用PCR技术检测转基因菊花是否含有目的基因时,需根据(
问题是你怎么知道要扩增哪个DNA片段呢?还有你要怎么纯化PCR用的目的DNA?用鸟枪打碎基因组后将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,让供体细胞提供的DNA的所有片段分别在各
扩增条带以后,有的可以分离出来,经过纯化后就可以获得目的基因~
冷却的时候才能使得引物和模板结合啊.这一步也叫退火.
看完楼上的回答,哥笑得无语了.一群饭桶在乱抽!PCR根本就不用ATP的,它是用dNTP(即三磷酸脱氧核苷酸)作原料的,与模板链结合时先生成焦磷酸,焦磷酸不稳定,容易转化为两个磷酸并释放能量(因为它其中
直接从生物组织中提取的DNA的量一般都是很少的,所以需要PCR进行扩增,使其达到一定的浓度,才方便进行下一步的操作.
如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genomeDNA做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.
我觉得用elutionbuffer没太大的影响,如果你非要觉得不好的话,只能在转化一遍重新提质粒或者抽成干粉再加水.我们一般用水就行.实在不行去测序呀.提的质粒和空质粒可以比较,如果你插入的基因足够大
菌落PCR的假阳性高很可能是因为你做PCR的循环数过大,我们实验室一般对于高拷贝数的质粒,循环数不会超过25个,一般用25个.我知道一家做这些,[威斯腾生物].感觉还可以
楼主能将你的问题问得再仔细点嘛?楼主这个说白了还是基因半保留复制的问题,A和B都是标记过的脱氧核苷酸链.楼主你画筷子图,你会发现最后16个DNA分子中,有两个DNA分子双链中的一链依然还是原来的还未标
在PCR中常用的DNA聚合酶Taq只具有5‘->3’的聚合活性(当然还有外切酶活性,这里暂不考虑)
PCR产物纯化试剂盒去除的是PCR反应体系中的离子、dNTP、引物以及聚合酶,收集其中的DNA片段.这只适合于几乎没有非特异性条带的PCR产物的收集.如果你的PCR产物具有非特异性条带,那么一定需要使
DNA复制起始阶段DNA聚合酶需要借助RNA引物后的3‘-OH来将dNTP连接到先导链上,然后激活复制.而PCR只是一种单纯的扩增技术,DNA和RNA均满足条件.
1、内参没有被扩增出来2、电泳时内参没加loadingbuffer或染料
我是ls小号,度娘审核答案你看这个图,不就是在一段DNA上截吗?就是说复制出的DNA双链中有的不是目的基因, 这句话我不太懂.在不考虑DNA外显子和内含子以及复制时出现的染色体变异等等情况下
恐怕还是cDNA的问题,actin因为量比较丰富,所以即使破坏一些仍能P出来,但你的目的基因就不同了
是的,不用就不能复制!因为DNA聚合酶需要引物才能起作用!另外,引物还起到准确复制特定序列的作用,提高复制的保真度!
PCR是用来将目的基因扩增的方法,要获得目的基因要用别的方法.酶切
这个问题就比较难了高中如果考到这个算难题其实你只要一步一步推就能够解出解法:复制四次,共有16个DNA分子,其中只含引物A的DNA片段有1个,由母链和引物A形成,只含引物B的DNA片段也只有1个,由母
PCR扩增出目的片段,需要自己提取模板,可以是RNA,或者DNA.引物会结合模板,如果特异性不够好,比如引物与模板的其他位点结合,在PCR过程中就会产生很多不同条带.