为什么在PCR反应过程中设置三个不同温度变化-搜答案-大师作文网

有时候溶解曲线看上去是很特异的,而电泳却能跑出两条带；加内参是为了做表达比对,跟内参比,这样才能知道是高表达还是地表达,也可以作为判断PCR反应过程是否顺利的依据.

那要看你做的那种PCR了,如果是为了检测某种DNA或者RNA的话,那你的空白对照,就是在那个空白对照的体系里不加入底物就好了

我是高中生（至少三个月以前还是）所以我所说的你大概可以理解PCR的意思是聚合酶链式反应,是一种扩增DNA的技术（就是复制DNA）DNA复制其实很复杂,DNA聚合酶有一种特性,他只能把脱氧核糖核酸接到一

在做QRT-PCR时,一定要有内参,即在PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH.内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求,但rea

聚合酶链式反应

你的一对引物的TM值最好不要超过3℃,退火温度的一般比TM值低5℃,太低的退火温度会导致非特异性的扩增反应参数可以设为：94℃2m94℃30s｝50℃30s｝30cycles72℃30s｝4℃∞若是无

至少有两组：实验组和对照组.根据实验不同还需要添加：空白组、阳性对照组、阴性对照组等.

第一个一般在94－95度左右,叫做变性,就是通过加热打开双链.第二个温度点叫做退火,根据引物的TM算出,一般比TM低5度,有利于引物的结合.第三个温度叫做延伸,一般采用72度.是引物结合后DNA聚合酶

做PCR反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应－－－－－－－－－－－－－－－－－－这个问题比较好理解,因为在循环结束后,体系中的taq酶可能很多正处于复制状态,如果此时降到室温,将会影响最终产率.

不知道你说的是PCR循环中的延伸还是循环结束后的终延伸.循环中的延伸步骤实际上是让taq聚合酶开始合成DNA,taq聚合酶是高温活性酶,在72度的时候合成DNA.如果是循环结束后的5～10分钟终延伸,

分别是三磷酸脱氧胞苷,三磷酸脱氧腺苷,三磷酸脱氧鸟苷,和三磷酸脱氧胸苷,它们是PCR中taq聚合酶合成DNA的原料.

taq聚合酶并不是说温度很高就不失活,而是能够在高温下维持一段时间活性.常规的taq聚合酶在PCR反应中大概能够维持2～3小时活性,实际上在2小时以后酶的活性就会显著降低了.为什么要将酶保存在低温呢,

每种酶在某个温度下出现最高活性的,也就是说那时候工作的效率是最高的,那个温度我们就叫做最适温度,所以PCR链式反应酶的最适温度是比较高的,如果我没有记错的话是在80度以上的,而几乎所有的酶在比较低的温

酶的选择模板浓度和纯度引物的选择退火温度这种问题最好还是问自己实验室的师兄师姐~

对照

DNTP是四种核苷酸,A、U、G、C.的混合物,主要作用在于PCR在第三步延伸的过程中,需要这几种核苷酸,以碱基互补原则,在酶的作用下与你需要扩增的模板链进行连接,从而达到复制模板链的目的.

我觉得您提的问题很复杂,本人就第三个问题和您探讨一下：金属屈服阶段呈现的不同形态,是与材料的塑性变形能力、塑性变形抗力以及形变强化能力等等三方面的因素有关,是这三方面综合的结果.就第一个问题,钢中C或

DMSO可以提高PCR的特异性,帮助扩增一些难扩的模板.但要摸索,量大的话会抑制扩增,而且最好用于扩增1KB以上模板.

quantificationcycle量化周期quantificationcyclevariance量化周期方差

循环中的延伸步骤实际上是让taq聚合酶开始合成DNA,taq聚合酶是高温活性酶,在72度的时候合成DNA.如果是循环结束后的5～10分钟终延伸,它的作用实际上是起到一个补偿作用,有时候你循环过程中的延