为什么要筛选含有目的基因的受体细胞?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/10 07:51:52
标记基因是用来标记载体的,换句话说,就是用来示踪载体的.哪个细胞转染了载体,那这个细胞就会带有标记基因.但是在克隆的时候,无法保证100%的载体插入了你的目的基因.所以有一部分细胞转染的是空的载体(带
标志基因一般是某种药物的抗性基因,如抗青霉素基因等.筛选时向培养基内加入该抗性基因抗的物质,则目的基因已注入受体细胞的细胞表达该抗性基因,而为注入基因的细胞则因为药物而死.
可能基因片段在扩增过程中出现突变可能启动子不够强可能受体细胞缺少表达该基因所需的原件
首先我说一下,质粒上并不是“抗生素基因”,而是“抗抗生素基因”,此种基因编码一些专一性的酶催化抗生素分解,比如抗青霉素的酶就是“贝塔内酰胺酶”,催化青霉素的内酰胺环开环.所以只要菌体内有这种带上了抗抗
基因文库可以构建所需的目的基因,并且不含有其他基因.一般母目的基因都很小,直接提取的话会含有很多其他片段的基因,难以将他们分离开来
基因文库技术分离目的基因所谓文库(1ibrary)是指一种全体的集合.基因文库(genelibrary)则是指某一生物类型全部基因的集合.这种集合是以重组体形式出现.某生物DNA片段群体与载体分子重组
转基因一般用质粒为载体质粒导入酵母菌后在细胞质中酵母基因在细胞核中不会相互干扰
筛选出来的是含目的基因的细胞啊.筛出来干什么,要看研究目的了.这步操作在体外.单细胞的生物,比如大肠杆菌,这点没什么疑问.如果是动植物,是可以进行细胞培养的,植物细胞可以再生成植株,动物的话可以对胚胎
我看是要用氨苄霉素进行筛选.楼主说的两点都对,所以因为第2点所说的原因,用四环素肯定会杀死你想要的细胞滴.至于第一点所担心的纯度问题,当然也是可能有某些细胞带有空质粒啦.这只能够靠前期插入(ligat
是的.不然的话,转入的基因无法转录,也就无法得到表达.另外,不整合的话,受体细胞分裂时,就无法进行复制,就容易丢失,不能稳定遗传.
因为重组质粒上有抗生素抗性基因,然后如果导入成功的话,那么含有目的基因的细胞中也就有了抗生素抗性基因.比如说这个抗性基因是抗四环素基因,那么就把细胞放在含有四环素的培养基中培养.能够在其中存活的,就是
导入受体细胞后再筛选.因为载体上有抗药性基因,成功导入载体的大肠杆菌就能在含抗生素的平板上活下来,没导进去的就死了.
这个就要看标志基因是在细菌质粒上,还是在目的基因上了.可能不同的教材,是从不同的角度出发的.
在构建表达载体的时候,在将目的基因的前面或者后面加上一个标志基因,这样可以通过荧光等手段在显微镜下就可以鉴定出目标基因是否进入细胞.例如GFP报告基因.简单了说就是给目的基因加上一个标记,让他们一起表
你说的一点都没错.所以标记基因作用的另外一个说法更准确:“筛选含有目的基因的细胞”,当然这个筛选也只是初步筛选,要想确认是否含有目的基因,要用“DNA分子杂交技术”.
主要运用的是质粒上存在的抗性基因,至少两种抗性基因便可用印章法判断了,个体水平看性状有无体现
1.将大量的目的基因和受体细胞混合,不一定每个受体细胞中都导入了目的基因,因而需筛选.利用重组质粒中的标记基因就可以将其筛选(当受体细胞中导入含某种抗盐基因的质粒时,该细胞就可在含盐量较大的选择培养基
四环素抗性基因在启动子后,因为插入了目的基因,所以四环素抗性基因的完整结果被破坏不能表达,所以在四环素的培养基上导入成功的细胞会死亡
只有测序是百分百靠谱.其他不靠谱的方法有PCR和酶切验证再问:PCR好像是cDNA片段迅速扩增的手段吧。再答:如果能扩出来不就证明含有目的基因了你不是学生物的吧。。。
将受体细胞培养在培养基中,后用布覆盖再上,轻压,使细胞附着在布上,将布放到含有标记基因的培养基中,如果不能生长,那么它就是含有目的基因.前提是,含有目的基因的质粒不含有标记基因