分光光度测量中,合适的吸光度和透光率的范围是多少?如何控制读数在上述范围类
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/11 19:12:44
DNA的碳环结构使它在OD260处有特异吸收,对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,当OD260=1时,dsDNA浓度约为50μg/mlssDNA浓度约为37μg/mlRNA浓度约为40μg/ml经验
先看下这两种仪器的工作光谱是不是一样,茶多酚的吸收波最大值在紫外光区还是可见光区呢?看了下,好像是在紫外区,所以,只要带有紫外光谱的分光光度计都可以测,前者一定可以,后者如果有紫外光,把光谱调到它的最
吸光度的计算公式的原理是朗伯-比尔定律A=lgI0/I=-lgT其中A为吸光率T为透光率I0为入射光强I为透过光强
直接按稀释后的算,最后一起算稀释倍数.理想状态下可以,真实液体稀释后二倍略大于原液
单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:A=-log(I/I.)=-lgT=kLcA为吸收度;I.为入射的单色光强度;I为透射的单色光
可见光区域的波长选择钨灯或卤素灯作光源,比色皿用玻璃或石英的都可以.紫外区域的波长选氢灯、氘灯、氙灯等作光源,比色皿只能选用石英的.因为玻璃吸收紫外光会影响透光强度.
定量更准确.当知道某个化合物的最大吸收波长后,在这个波长下做定量很准确的.但由于紫外光谱一般是带状光谱,吸收峰很宽,而且受介质、温度、浓度杂质等影响很大,因此定性比较困难.
胜过我们梦尖上那小小的嫩枝何以它如此轻盈一路飘浮:墙壁,阳台,天空垦拓地的一部份无声的鲜血充盈的血管,它是碗里叫他怎么才能放得中哈哈
可能是“消光度”(T)和“消光系数”(E)吧?吸光度A=-logT;比尔定律:A=-logT=E.l.C,(l=比色皿的厚度,C=待测溶液的浓度)
它原理是当白光通过滤片后,得到近似单色光,让单色光照射有色溶液,没被吸收的透射光投射到光电池上,产生光电流,从而求出被测物.如果没有色,光完全通过没有被吸收就测不出是什么物质了…
吸光度A=-lgT(T为透光率)
使用方法 1.接通电源,打开仪器开关,掀开样品室暗箱盖,预热10分钟. 2.将灵敏度开关调至“1”档(若零点调节器调不到“0”时,需选用较高档.) 3.根据所需波长转动波长选择钮. 4.将空白
溶液配制有问题,1号标本来浓度就低,仪器分辨率低可能出现这种情况,建议多配几个标样,可以消除个别标样配制不准带来的误差.
理论上应该在0.2-0.8,但实际工作中发现吸光度在0.1-0.4之间比较合适,测定误差较小.
不能.吸光度,absorbance,是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的以10为底的对数(即lg(Iin/Iout),影响它的因素有溶剂、浓度、温度等等.
我虽然不太明白具体的细节,但是如果每次都是一半的话,应该排除仪器和操作还有偶然误差,建议从浓度和显色剂的显色时间着手.
先进行光谱扫描,确定特征波长,然后确定稀释倍数,使该稀释液在特征波长下的吸收值在合适的范围内
因为吸光度在分光光度计上的表盘读数是按对数尺度刻分的(透射率是按十进制刻画的).吸光度在0.2~0.8的范围内的读数误差最小.调整标样和待测样的浓度使其吸收正好落在这一范围内.
正常现象颜色太深或者比色皿太厚可稀释溶液或者选择薄的比色皿通常用于分析的吸光度为0.0.8大概不能太大也不要太小具体查分析化学手册
吸光度用A表示.A=abc,其中a为吸光系数,单位L/(g·cm),b为液层厚度(通常为比色皿的厚度),单位cm,c为溶液浓度,单位g/L影响吸光度的因数是b和c.a是与溶质有关的一个常量.此外,温度