同一引物扩增不同基因组,出现好多条带

正反向引物就是一个引物是从3端开始,另一个是从5端开始的.看分子生物学的书吧,里面有详细介绍DNA复制的啊,就是那些理论而已.解释的太简单了,我做过pcr扩增的实验,不懂得可以问我,我尽量回答.

如果是用在原核上,没有多大的却别,但是如果用在真核上,cDNA扩增出来的产物就比DNA直接扩增出来的短.因为cDNA是RNA逆转录过来的,而DNA里面除了RNA上面相对的片段还有内含子的片段,在扩增的

引物3'端末端有互补序列,这样造成引物以引物为模板进行延伸,造成引物二聚体.

因为DNA聚合时需要3‘OH,这个只能由引物提供（没原因,就因为是那样）.这个引物是一小段RNA,引物绝对是RNA,而不是DNA.看看DNA复制需要什么酶就知道了,需要依赖DNA的RNA聚合酶（DDR

那是一对引物,通常所说的正向,反向.他们的碱基不一样,当然Tm值也就不一样了.所以设计引物时尽量设计一术的Tm值,有利于选择最佳的退火温度.

把两个目的基因引物浓度和内参引物调成一致的,因为在计算结果时是要和内参基因对比的.

用primerblast,输进去上下游,选好种属和扩增对象search不就出来了

这个很正常,引物本身的结构和模板的结合牢固程度,就会影响扩增的效率,导致扩增出来的片段亮度不同.

换一对引物试试再问：换了三对了，就是没有目标带再答：模板量少点不知道有没有用酶切来提高基因组PCR成功率这种做法哈如果你是在别的地方看到这方法可行就试试吧

首先你应该用PCR的内参照基因作为阳性对照验证你的PCR体系有无问题,然后看看primer上你的引物会不会形成发卡结构,引物间的二聚体,如果有可以尝试在做PCR之前用沸水将引物煮五分钟再在冰上冷却以减

若是根据已知序列扩增未知物种的相应序列,可以根据先根据已知序列进行Blast搜索,发现其他同源序列,保存后进行比对,找出其中较保守区域,并根据Primer或Oligo等软件对某条序列进行分析,搜索其中

基本不是.当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出、扩增效率低的问题.如巢式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段.有些重复片段的扩增,GC含量高的

解题思路：PCR技术解题过程：varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/readq.p

根据mRNA（真核的）设计的引物,一般如果用DNA做模板的话,那么会出现的情况会是以下几种.一是能扩增出条带,但目标条带比你要的条带要大,因为你会连同内含子一同扩增出来,所以片段会偏大.二是什么都扩增

引物长度和专一性常见的引物长度为18-30个碱基.短的引物（≤15碱基）能非常高效地结合,但是它们的专一性不够.较长的引物能提高专一性,然而退火效率低,从而导致PCR产量低下.同时应避免编码单一序列和

你的问题不明确.首先你要给出PCR的引物,说明这对引物是扩增什么基因的,这个目的基因的长度,然后通过电泳条带与两边的marker比较,推算出其长度,如果符合你需要扩增的基因的长度,就可以认为是正确的了

PCR产物测序的最大风险是有在凝胶上看起来的一个条带,实际上有多个分子.也就是说长度相似的分子有可能在电泳的时候只有一条带.如果只是进行PCR产物回收,没有进行凝胶分离的过程的话,东西可能更多了.问题

这要具体分析.一种可能是你的PCR产物是非特异性片段,所以长度不一,这可以通过和你预期PCR产物的长度进行比较来判断.另一种可能是该基因在不同情况下有不同的剪接模式（alternativesplici

如果引物序列,PCR体系,程序,以及所用的物种都和文献一样的话,可考虑两种情况：1.你所参考的文献真实度有待考量.2.你所提取的该物种DNA质量不好.需重新提纯.

“同一对引物可以扩增出不同基因；不同引物也可以扩增出相同基因?”“在基因诊断时,比如镰状细胞贫血是点突变,患者和正常人在突变点两侧的基因是一样的”　　这里混淆了基因和基因序列的概念.患者和正常人的基因