外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

1953年,沃森和克里克共同提出了DNA分子的双螺旋结构,标志着生物科学的发展进入了分子生物学阶段.DNA双螺旋结构的提出开始,便开启了分子生物学时代.分子生物学使生物大分子的研究进入一个新的阶段,使

B质粒（细菌的抗药性基因、固氮基因、抗生素合成基因等均在质粒上）

不是滴~~~~再问：为什么再答：将目的基因与质粒结合为重组质粒是在细胞外进行的，不论的这个重组质粒的作用是什么。再问：那与某种病毒结合为重组DNA是在细胞内进行么，为什么再答：那要看你的这个病毒是否是

你需要的是理解:DNA是双链的吧.比如说左边一条是1的,右边的是2的.121212121212那么上下隔开1与1间就要用DNA聚合酶``连接单个链上的DNA片段左右1和2的就需要DNA连接酶```连接

不一定.解析：作为目的基因运载体的一种,质粒被广泛适用于各种人为基因重组,其中大肠杆菌中的质粒以及农杆菌的Ti质粒最为广泛应用于转基因牛,抗虫棉,转基因羊等等家畜及农作物.再问：宿主细胞不会对导入的质

AC、人的胰岛素基因与大肠杆菌的质粒DNA分子重组不涉及减数分裂过程，基因自由组合定律和基因分离定律发生在减数分裂过程中，AC错误；B、DNA的复制具有半保留复制的原则，而人的胰岛素基因与大肠杆菌的质

一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增.看能否出现目的基因的扩增产物.还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只

注意一个问题,限制性核算内切酶识别的序列必然是一段回文序列,而不是随便的一个序列.回文序列的简单意思是在这段序列从3'到5‘读出的序列都是相同的.所以根据酶的专一性,只能用同种酶才可切出同种末端.

步骤还是条件?再问：条件再答：工具酶目的基因运载体受体细胞

1、体外进行2、质粒是怎么提取出来的呢：很复杂,不同的质粒有不同方式.基本上培养细菌,裂解细菌,离心处理或聚乙二醇沉淀法3、然后怎么送入受体细胞呢：用氯化钙处理细胞增加细胞膜通透性使质粒进入宿主细胞另

如果是重组质粒的话,应该两种,正义基因表达载体和反义基因表达载体.再问：���������廹���������������ͷ��������������

不对,因为太绝对!一般情况下是用同一种限制性内切酶,这样暴露同样的黏性末端,然后用DNA连接酶进行连接.但是也存在不同的限制性内切酶切割形成相同的黏性末端.

这个可以通过pcr等技术进行鉴定.抗性基因可以排除无抗性的菌或质粒载体,易于筛选

错误,可以筛选.具体解释如下：筛选标记基因有两个含义,一个是对菌用,目的是筛选出阳性的工程菌,这一基因是不会插入靶细胞（即动植物细胞等）DNA序列的.第二个则是存在于T-DNA区域,将会插入靶细胞DN

启动子和终止子是帮助外源DNA表达的,就是控制转录过程的,要想进行复制,需要的是复制原点

基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心.　　将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体,　　首先要用一定

哈哈,我就是做这个的,因为基因直接克隆出来,酶切得不太好,而且也不容易连到PET上面,而PMD是克隆载体,上面添加了多聚T,PCR的产物末端通常会多P出几个多聚A,A和T互补,再用连接液连接,就非常容

筛选细胞的话是对的.但是转基因植物是不用标记基因筛选的,目的基因导入植物后,用分子杂交检验目的基因是否插入和表达,再将表达了的细胞（或组织）进行组织培养获得新植株.所以转基因植物是不用标记基因筛选的.

标记基因不一定是抗性基因,还可以是其它的基因,比如营养基因（表达出特定的营养物质）或生化基因（比如绿色荧光蛋白基因等）,总之,标记基因有很多种,只要能提供用于筛选的特征即可,不一定必须是抗性基因

是目的基因这样才能说明你转化进去的是连了目的基因的质粒而不是自连的质粒.转化后挑菌摇菌后提了质粒才能测序,浓度才够再问：谢谢，在下是新手。再问一下：是连了目的基因的质粒还是单纯的目的基因呢？提质粒测序