大提质粒结果跑胶有两条带指示剂有一条,上边有一条

指示剂有突越点大学你学化学就知道了

质粒转化应该比较容易,要检查一下引物对不对.其次是你的模板够不够,因为农杆菌中质粒拷贝数很低.可以提出质粒后再来PCR再问：嗯，载体上没有通用引物，我是用基因特异引物做的。摇菌时我要了24个小时呢，本

你的题设是错误的,说反了,应该是结果偏小.只有氢氧化钠过量时酚酞才会变红,才会认为是滴定终点,比实际终点要晚,所以消耗的氢氧化钠比实际体积要大.所以待测物质为盐酸时,结果偏大,待测物质为碱时,结果偏小

如果PCR系统没有问题,很可能是质粒和染色体发生了重组.建议提细菌的genomeDNA做一次PCR.如果是阳性,就说明是这样.另外,还可以另挑几个菌落,重新提质粒扩增.

我觉得用elutionbuffer没太大的影响,如果你非要觉得不好的话,只能在转化一遍重新提质粒或者抽成干粉再加水.我们一般用水就行.实在不行去测序呀.提的质粒和空质粒可以比较,如果你插入的基因足够大

能确定菌液pcr出来的就是目的条带吗?如果确定,那就是可能质粒抽提和酶切这两步出了问题

1.先看下PCR电泳图里杂带多不多,若有的话很可能非特异性扩增了2.若条带干净,仍然有可能存在非特异性扩增,引物特异性不高导致竞争结合可将DNA直接酶切看是否能切出你的目标片段3.序列比对结果不能只看

只要制备胶等过程都没问题,marker也跑出条带了,那这种情况最有可能的原因还是质粒的浓度过低.所以,虽然OD值可测出来,但胶显示不出来,我就遇到过这样的情况,还算很普通的现象.下次再加大菌量就行.再

别人给的质粒,第一要做的是转化保种啊,别人给那点哪够分析.转化完了自己抽质粒分析.质粒直接跑电泳理论上是三条带,要想分析建议做单酶切再电泳.再问：又做了一次，拿个质粒菌做阳性对照也都没有提出来。不知道

偏小一份NaOH和一份HCl反应,一份Na2CO3和两份HCL反应,所以用的滴定剂也就是所谓的NaOH和Na2CO3混合物的量要比全用NaOH滴定所用的量要少.话挺绕的~不好意思啦……

一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热（90度以上）一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大（不一定是目标产物）再问：我做的是菌落PCR电泳检测结果，我

先说质粒电泳图.最上面发亮的是加样孔,下面最亮的是未降解的RNA,中间那条亮度最低的是质粒.几点建议:1一定要加marker,否则很难判断大小,2胶浓度应该再小一点,3跑得时间太短,4加些DNAsef

利用样本目的蛋白的光密度比内参照基因条带的光密度,比较不同样本的相对表达率.

首先试剂应该没有问题,现在连作为marker的基因都扩不好,那么一个是你的引物有问题,另一个就是反转录出问题了.遇到这样的问题应该一步一步的排除.首先确定反转录没有问题,一般的鉴定办法是扩增marke

酶切位点消失啦,测个序看看.再问：测序了，说我的链接质粒没有信号再答：重新做吧，多半不对！

非特异性扩增.建议试试：1提高退火温度,或加点DMSO2重新设计引物3做分段PCR,再连起来4全基因组合成

首先明确一个问题,你的这个酶切位点在这个质粒中是唯一的吗,也就是说你只想把这个质粒切开吗?看你的结果好象这种可能性大些,那样我觉得最有可能是梅切不完全,即切开的线形质粒会比未切开的质粒跑得慢但两条带很

切开了吧.质粒没切开前是超螺旋,在电泳中比有切口的开环质粒跑得快.

首先,你要确定你所切下来的目标条带的分子量大小.如果切下来的片段分子量小的话（小于1kb),经常会出现看不到的情况.因为从质粒上面切下来的片段摩尔数是和质粒一致的,在分子量很小的情况下,等摩尔数的小片

首先怀疑,特异性不好,解决办法：1,可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍；2,适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环（也就是在