实时定量 重复性

荧光定量PCR和实时荧光定量PCR是一样的啊

需要试剂盒么,我们用天根的mixture和sybergreen,引物自己网上找别人用过的,反转录cDNA

tpcr的机器会给出cT值和fluorescence的值,cDNA值自己计算

请用primerexpress设计就行.你想去找非常保守的区域设计引物?可以,那你把这个物种的所有亚种的此段DNA序列做一个保守型分析就行.一般来说clustalX就可以了.再问：ClustalX排列

PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右）,DNA聚合

小说的文字有很多都不是最准确的,既然上面写的是“实时”,那么就应该是实时荧光定量PCR,否则普通PCR做不到“实时”.所以是一回事.

实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能

内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin.或者18srRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说

首先你这样做出来的统计没有意义.应该是至少3次独立实验,而不是重复3次PCR.如果3次试验,每次重复3次（取平均值算一次）.然后先定各个基因在对照组的值为一,再算出其他组该基因的相对量,比如内参CT值

在百度知道里怎么会问这个问题?都有专业的书籍或者文献可供参考的.不同的试剂公司还有荧光定量的培训PPT,你需要的话我可以给你发过去.

说一下自己做实验时候用到的东西,血液提取mRNA还是采用试剂盒来提取,手工法极不推荐,但是试剂盒还是蛮贵的,可以问一下天根公司,价格还算可意,效果也不错.逆转录过程可以用Fermentas一款逆转录试

最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了一般用的是灭菌的双蒸水保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别

你好你的情况是小三羊病毒是阴性这个时候基本上属于休眠状态传染性很小或者基本上不传染病毒没有复制在正常人病毒范围内你的肝功能正常是不需要治疗的如果你想怀孕的话是可以的但是要等怀孕后三个月注射高效免疫球胆

聚合酶链式反应(PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增.在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析.无论定性

1.可以测量DNA,cDNA的绝对或者相对数量.扩增曲线（或者Ct值）出现越早,说明靶目标的含量越高.2.可以检测SNAP.单个核苷酸位点的多形性.比如在一个位点上有A和G两种基因型.引物使用一样,但

实时荧光定量PCR的重复性好有两个含义：一次实验每个孔需要做3-6个重复孔,如果几个孔曲线比较一致,就是重复性好.三次不同的实验结果比较一致,也是表示RT-PCR重复性好.再问：我想顺便问下，实时荧光

看你的情况估计是不用设计内参了说下我的看法,仅供参考设置7管标准物质,每个再三次重复.然后再弄上你的样品,先跑跑试试主要步骤就是加好样,设置下程序,然后就开始了.最后比较下测的起始模板量相对定量不需要

1.按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率.开机顺序：先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验.

可以,不过要用TaqMan法

你的病毒量若是小于10^3,就说明没问题,若大于的话就是阳性,受乙肝病毒侵染.你的是10的2次方,没问题的!想了解详细点,去查下乙肝两对半,和肝功能,就行了!