实时荧光定量PCR
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/12 17:36:48
荧光定量PCR和实时荧光定量PCR是一样的啊
tpcr的机器会给出cT值和fluorescence的值,cDNA值自己计算
PCR(聚合酶链式反应)是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合
小说的文字有很多都不是最准确的,既然上面写的是“实时”,那么就应该是实时荧光定量PCR,否则普通PCR做不到“实时”.所以是一回事.
实时定量的引物设计要求比较高,可以按普通引物设计的方法来做,但是设计时要注意扩增的片段不能太大,最好在250bp-100bp之间.同时要保证这对引物有绝对的特异性,因为要是产生非特异性扩增的话,就不能
1纳摩尔(nmol)=1000皮摩尔(pmol)9.96nmol/X=100pmol/ul解出X=99.6ul答:加入100微升vddH20PS.一般我们买回引物,管它那么多,都加100微升水用着,没
内参就是一个表达量在各个组基本保持不变的基因,又叫看家基因,比如常用的GAPDH,actin.或者18srRNA也可以.如果内参表达量一致,说明你PCR的上样量一致,样本的质量也一致.如果出入很大,说
首先你这样做出来的统计没有意义.应该是至少3次独立实验,而不是重复3次PCR.如果3次试验,每次重复3次(取平均值算一次).然后先定各个基因在对照组的值为一,再算出其他组该基因的相对量,比如内参CT值
没有按照仪器的分类.但ABI的机器要加入roxdye对各个样本做均一处理,而roche的机器因为原理不同而不需要这个.但方法却有很多,相对定量、绝对定量;探针有不同的设计方案;
打开软件-setup-advacedsetup-左手setup中第一行experimentproperties中有一项是whichreagentsdoyouwanttousetodetecttheta
所谓的实时荧光定量PCR就是通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析.其原理是在实时荧光定量PCR反应中,引入了一种荧光化学物质,随着PCR反应的进行,
最好还是在冰上做啦,一次两次没有问题,久了多了可能问题就出来了一般用的是灭菌的双蒸水保证引物的终浓度就可以.都是用水稀释的,没啥差别
一般的RT-PCR引物是不能用来做是实时荧光定量的的引物的,但是你可以设计出兼顾二者的引物,除了要注意一般引物设计的原则外,愚见认为还要注意下两个问题:
如果有标准曲线,按照标准曲线计算.一般都是相对量.则用deltadeltaCT方法来计算.举例如下:对照组基因A的CT值为20,内参(比如βactin)CT值15.实验组基因ACT值18,内参CT值1
你好你的情况是小三羊病毒是阴性这个时候基本上属于休眠状态传染性很小或者基本上不传染病毒没有复制在正常人病毒范围内你的肝功能正常是不需要治疗的如果你想怀孕的话是可以的但是要等怀孕后三个月注射高效免疫球胆
完全两个不同的概念,梯度PCR是指你的PCR仪在设置的时候可以同一时间不同位置设置一个从高到低的温度梯度,以便在不知道退火温度的情况下选择一个最适宜的退火温度.二实时荧光定量PCR是通过再PCR过程中
聚合酶链式反应(PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增.在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析.无论定性
是的,这几个都是定量pcr.因为它能实时检测,所以又叫实时定量pcr.末端标记说的是它探针末端标记有检测基团
1.按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率.开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验.
你的病毒量若是小于10^3,就说明没问题,若大于的话就是阳性,受乙肝病毒侵染.你的是10的2次方,没问题的!想了解详细点,去查下乙肝两对半,和肝功能,就行了!