大师作文网异丙醇沉淀DNA后结冰
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/17 08:23:22
提问的女孩2011-1-13因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况（比如你的实验）可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,
有,DNA有可能不会全部都沉淀出来,所以最后DNA的量会偏低
第一次离心是去除组织破碎的残渣,DNA位于上清液.第二次离心是氯仿异戊醇抽提,去除蛋白,DNA位于上清液.第三次是高盐低温醇溶液析出DNA,DNA位于沉淀中.
一般氯仿异戊醇都是室温就可以了,你提取的什么组织呢?再问：我取的是丁香叶片有点老现在提取不出来怎么办？提取出来的都是跟果冻似的东西，有极少有白色絮状沉淀，但是跑电泳根本没有东西，有絮状的电泳显示是RN
个人认为DNA双螺旋最外层有亲水的磷酸,这就是它能融于水中而不能融于有机溶剂的原因!
二者没有什么本质区别.不过异丙醇沉淀效率高一些.用异丙醇沉淀的话等体积就可以了,用无水乙醇的话要用二倍体积去沉淀.
离心后看到沉淀没?用70%洗涤后,白色应该更加明显,要是白色沉淀没有了,那会不会是你的乙醇不是70%?还有就是,实验失败找原因很麻烦的,也很费时间的,最好,最简单的方法是按步骤重做一次.
白色混浊即饱和了,沉淀后取清液即可.
这个是要看情况的.平常我们都用异丙醇沉淀,因为它沉淀效果比较好,但是异丙醇不容易除去,要用乙醇洗,乙醇就很容易除去啦
不溶的不是DNA,是蛋白没洗干净跑下电泳看看DNA条带就知道提出来没了
YouhavetothinkaboutthesolubilityofDNAinwaterandethanol.ThesurfaceofDNAishighlychargedandasaresultapo
变浑浊吧,变成白色沉淀啦.是dna和少量蛋白质析出.
配制方法：在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g苯酚,在水浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解.将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗中,轻轻振荡混合,使其成为乳状液.静止7～1
DNA干燥后本身就是透明片状的.
在做胶回收的时候,你最好看着说明书来做.每个胶回收产品的溶胶液不同,像QIAGEN等是建议加异丙醇的,而其他的一些回收试剂盒并不需要加异丙醇,加了异丙醇有时会使琼脂糖也沉淀下来,包裹住了DNA,反而使
异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子.有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度.在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,
因为低温可以促进DNA的沉淀,在DNA量很少的情况（比如你的实验）可以提高抽提效率.不过如果DNA量较多时,常温也没问题,比如我们做小鼠脚趾的基因型鉴定时,都是常温操作的,沉淀照样超多.
marker能看到吗?marker很清楚,电泳就没问题.说明没有DNA.可能提取失败,沉淀也许是盐.测测浓度吧,应该很低.看看提取程序是不是有问题.
异丙醇是为了增强DNA和柱子的吸附不过一般都不需要加的吧再问：异丙醇会不会在我们转移到柱子之前就把DNA沉淀了，转移的适合可能就留在管底了，转移到柱子上的量就少了再答：不会哪有那么快而且常温下沉淀的很
酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA；中间为蛋白（有时看不到）；下层为有机相.原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间；而D