怎么才能使western的条带比较漂亮

你的对照组是什么?对照组有没有出现问题?有问题的话是很可能是你在操作过程中有问题膜的质量是否有问题?再问：对照组没问题。膜是pvdf，质量有么问题？操作怎么不当了？会导致什么？请帮忙分析一下，合理再加

如果用的Marker有颜色,对颜色.如果是一色的,往往是最小的那个很淡看不清.

如果marker跑在胶上的话说明胶是没问题的,要么是你样品蛋白含量太低,可以将样品浓缩一下,也可以加大上样量；或者可能你配的胶的浓度有问题,这样样品可能跑不开,建议根据蛋白的分子量按照分子克隆选用分离

小写表示西方的,大写特指西方人再问：是westerncountries还是Western...再答：westerncountries应该用小写，当w大写时，Western充当的是名词，比如说TheWe

erk1/2就表示erk1+erk2分子量分别42,44.也有的抗体只识别其中之一.一般情况下磷酸化不会导致蛋白分子量增加.具体看抗体说明书.CREB容易出两条带原因是CREB和另外一个蛋白同源性太高

不排除是预染Marker质量又问题再问：marker没有问题，实验室其他人做实验就没有问题。因为我是独立出来的，所以实验过程和仪器与他们不是很相同再答：那建议你在适当延长一下转膜的时间吧，三、四个小时

你好!我也做western有一段时间了很高兴和你探讨下这个问题我觉得该现象很可能的原因是转膜过程中出问题了,即1、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸（三明治组合）之间气泡没赶干净导致的.2、

利用样本目的蛋白的光密度比内参照基因条带的光密度,比较不同样本的相对表达率.

1.protein-blot之前用Bradford测一下总蛋白量,估摸一下2.做完第一次后,用photoshop软件测一下各个内参条带的光密度值,这样可以给第二次调整的时候一个参考.

用迁移率算迁移率=蛋白质分子的移动距离：前沿分子的移动距离迁移率（m）,蛋白质分子量（M）lg(M)=-bm+k其中b和k为常数也就是说迁移率（m）与蛋白质分子量（M）的对数成反比实验中用已知蛋白质分

按照老师教你的步骤严格执行.要遵循一个道理,就是样品上样量,一抗,二抗浓度都要仔细认真的反复摸索,找出最合适的用量,要大胆地去尝试不同的实验条件,然后细心地总结.每换一个检测对象——蛋白或者抗体做we

先是一个叫Southern的人发明Southernblot后来发明的类似的RNA杂交就和Southern对应地取了个名字叫Northernblot再后来的蛋白杂交就过来凑数干脆叫Westernblot

但即使是这样,WesternBlot得到的条带大小依然会和预计的分子量大小有出入.大部分常见的原因如下：1.翻译后修饰—比如蛋白的磷酸化,糖基化等,这些都会增加蛋白的分子量大小.2.翻译后剪切—比如很

你确定不是跑胶的时候就是弯曲的?建议下次同时跑两块胶,一块转膜,一块考染看看.如果是跑的就是弯曲的,要考虑胶是否均匀,以及拔梳子时是否导致浓缩胶与分离胶平面发生移动等情况.如果确定是转膜时导致的条带弯

做一下考马斯亮蓝染胶看是不是全部转完了.照您的描述,应该是转上了,可能是有点过.也可以做一下丽春红染膜,确认看看是不是转上了.同意黑皮地雷的说法,Marker很容易转上的.

转膜有问题吗?转膜时那些条带有气泡产生吗?请问你做了这些样品对应的actin内参了吗?丽春红染色显示的条带怎样?若内参没问题,是不是你加底物没有弄均匀?你的一抗和二抗什么条件?

左右正确确定上下你放正确了吗,这种现象只能想到这个原因再问：我也没想到其他原因，上下不会有错

可能是一抗和二抗浓度过高了,稀释一下看看吧再问：稀释了以后条带就出不来了啊。。。再答：二抗的浓度呢，有没有稀释，还有注意二抗与一抗的种属关系，必须是相抗的，封闭时间要延长，且摇床的速度不宜过快再问：二

两层还是两条?两层是你的X光片移动造成的,两条嘛,可能是形成了二聚体,或者蛋白有修饰,或者蛋白被剪切,或者抗体识别其同源性高的蛋白了.

PCR扩增的结果和模板的质量有直接的关系,在PCR扩增中如果模板纯度高,很低的量都可以进行扩增的.提取细菌的DNA量不多但纯度高,即使DNA电泳检测不到条带,PCR仍然能扩出条带.希望你看明白了.