CTAB提DNA需要多长时间
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/23 04:29:17
多放一点液氮,磨得时间适当长一些.如果你的样品比较多,在液氮还没有蒸发前迅速把粉末转移到EP官管中,然后把它暂时放到-20的冰箱中,等所有的样品全部磨好后统一加CTAB.你做实验的时候材料最好尽量新鲜
真是牛人啊~没加沉淀剂吧?
CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r/
(1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r
前面的步骤没有操作好,要么是你的样品比较特殊,含有较多的色素或脂肪,先用电泳检测一下,如果条带清楚就可以用,如果混乱要修改实验设计.不知道你提的是动物还是植物的DNA,估计可能是植物色素或者是叶片的蜡
液氮只是为了便于破碎植物组织,没有也一样能提取DNA,毕竟加CTAB后还要65度水浴,分解得厉害的话就减少振荡,或增大CTAB用量,使DNA尽可能多地浸取出来.再问:那研磨的时候为了是它充分的研磨是要
你上样量是多少?可能是你提的DNA浓度低了,
你在沉时加入1/2V的5MNacl和2V的无水乙醇,主要是高浓度盐离子可以使多糖悬浮在溶液中,无水乙醇可以减少杂质离子的沉淀,试试吧,我一直这么做,效果还可以吧再问:哦,非常感谢!我一直都是用1/10
CTAB法原理CTAB(hexadecyltrimethylammoniumbromide,十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性.在高离子强度的
取1000ml容量瓶,加12.11克Tris碱、7克NaCl、7.464克EDTA-Na2、20克CTAB,加约900毫升去离子水或双蒸水(没有就用蒸馏水也行),用盐酸分析纯调pH至8.0,后定容至1
(1)可以的,液氮冷冻更容易破碎细胞壁释放DNA,但是不冷冻也没关系的,提取的DNA量即使少点也足够满足试验要求.(2)-20度足够保存,用一年以上都没问题,超低温保存时间当然更长,但是切忌反复冻融,
水相与氯仿之间有类似白色的膜,那说明上次抽提的还不是很干净,里面有蛋白之类的杂质.1、你可以再抽提一次,杂质肯定会减少;2、吸样的时候小心点,不要全吸了,动作轻柔点,不要猛吸,否则杂质也会没吸的.如果
呃……能说下具体的改动部分吗?一般来说,改良法是应用于多年生植物组织的DNA提取,含有较多的酚,多糖,硅质等,棉花和水稻的DNA提取也需要一定的修改.思路有两个,一方面尽量去除杂质、蛋白和脂类,另一方
亲子鉴定一般都是7-10个工作日出结果.然后出具报告书.每个鉴定机构的通知结果的方法不同.所以您问的问题,
1,研磨要充分2,纯化的时候小心点不要吸取杂质以提高纯度详细的可看我们团队的贴吧,里面有专门的贴子,也可以来讨论
Tris饱和酚分上相(tris)和下相即有机相酚,这样保存可以避免酚的挥发以及防止酚类氧化成醌,抽提时取下层酚相.在吸取的时候要将枪头插到水相以下的酚相.若吸到的是上层tris溶液,它会与我们的上清互
下游做PCR的话,应该保证模板的纯度,CTAB法提取多半会得到浓度不错但纯度不够的DNA,建议将得到的DNA进行纯化,或者直接使用试剂盒提取,现在的国产试剂盒都还不错的,节约时间又不贵
1)取材料,加液氮研磨成粉末状,迅速移入1.5mlEppendorf管中;(2)加入800μl的CTAB提取缓冲液,混匀(CTAB在65℃水浴预热),每5min轻轻震荡几次,20min后12000r/
我用过CTAB法提取植物叶片DNA,会得到叶片中所有的DNA,总DNA里当然包括叶绿体和线粒体DNA,使用这种模板可以进行叶绿体和线粒体基因组上的扩增,我以前做过TRNL_F这个基因的扩增,用的就是C