folin法测蛋白质含量对标准蛋白有什么要求
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/22 12:43:30
用标准加入法,必过原点.酸和水混合后,最好多静置一会,要不测出来的数值会不稳定.
酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用.浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳(1%),硝酸纳(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)等
没有特别的要求,这个方法的原理是试剂和蛋白质中酪氨酸、苯丙氨酸残基反应显色,蛋白只要能溶于水形成均匀澄清溶液,不会影响显色,就可以了.
避光没做好、试剂失效
没有特别的要求,这个方法的原理是试剂和蛋白质中酪氨酸、苯丙氨酸残基反应显色,蛋白只要能溶于水形成均匀澄清溶液,不会影响显色,就可以了.
大概与样品中的干扰物质有关.干扰Folin酚法的物质有:酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等.干扰考马斯法的:主要是去污剂,如TritonX-100、十二烷基硫酸钠(SDS)和0
不能,FOLIN酚法测定是可溶蛋白质,鱼粉蛋白质不溶于水,难以用这种方法测定.可以用凯式定氮法测定.先硝化后测定.
Folin酚法最好,准确度最高;双缩脲法最差,准确度最低;现很少用;考马斯亮蓝G250法介于两者之间.
蛋白质测定的国标规定方法——凯氏定氮法介绍【GB/T5009.5—1985】食品中蛋白质的测定方法本标准适用于各类食品中蛋白质的测定.1原理蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使
于硕,我也不知道啊,咋办啊,给个最佳吧.再问:你哪位呀,,这个问题真的没有人会么再答:216寝室全体向你致敬
紫外吸收法是以含有苯环的氨基酸为基础测量的,OD280值,各种蛋白含有的苯环的氨基酸数量不一定,所以只是大致估计.LowryProteinAssayKit福林酚蛋白浓度测定试剂盒\x05产品说明:在碱
可以.凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法.即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,
第一步相当于双缩脲反应,在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物;第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)在碱性条件下极不稳定,易被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物(呈蓝色反应),
--不做标准曲线你怎么通过吸光度来计算浓度?因为两者反应更灵敏,至于为什么反应更灵敏,问化学牛人.
--|||这个还用问吗.测定未知样品的OD后在曲线上找对应的浓度啊.
优点:是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多;重复性好.颜色深,析光度.缺点:是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多.近年来folin-酚法逐渐被考马斯亮兰
Folin—酚试剂法最早是由Lowry确定的测定蛋白质浓度的基本方法.以后在生物化学领域得到广泛的应用.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从
减少系统误差.每次测量的时候总有一些不可控制的随机的误差吧.应该是这个哈.
Folin-酚试剂法测定蛋白质含量是双缩脲法原理,所用的试剂是由两部分组成的.第一部分相当于双缩脲试剂,第二部分为Folin-酚试剂(磷钨酸和磷钼酸混合液).因此,反应的程序也是分两步进行的.第一步相
这.双缩脲法本来就不是一个定量的好办法,主要是它的灵敏度太低.要作为定量方法,还不让做标准曲线,这个有点不靠谱.不过难道这个题的意思是拿EDTA或者HCl去滴定,滴定到颜色变成蓝色为止,然后计算EDT