蛋白紫外吸收
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/10 18:03:50
由于蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸,因此蛋白质溶液在280nm处具有紫外吸收高峰.在一定浓度范围内,蛋白质溶液在此波长处的吸光度与其浓度呈正比关系,因此利用这一性质可进行蛋白质定量测定.该
核酸会吸收紫外光,所以蛋白质溶液中有核酸会有影响.但是测蛋白质溶液是一般会用260nm,因为核酸吸收最厉害在280nm.但是如果你要很准确,可以考虑用nuclease.
当在饱和碳氢化合物中引入含有p键的不饱和基团时,会使这些化合物的最大吸收波长位移至紫外及可见光区,这种不饱和基团成为生色团.例如,CH2CH2的最大吸收波长位于171nm处,而乙烷则位于远紫外区.首先
原子吸收分光光度计是利用待测元素的共振辐射,通过其原子蒸汽,测定其吸光度,主要用于痕量元素杂质的分析.紫外分光光度计是利用有机化合物在紫外区具有特征的吸收光谱,而对有机物质进行定性鉴定及定量测定.原子
波长不同:蛋白在280nm,核酸在260nm.这取决于生色团,即分子结构.均一性不同:核酸的每种碱基都有吸收,而且相差不多,因而定量时线性很好;蛋白的20种构件中只有三种有吸收,相互差异也较大,所以蛋
在1.8~2.0间表示核酸较为纯净,没有大的蛋白质污染.ps:其实这种判断方法不是可靠的.分子克隆第三版专门提到过.
其实我个人觉得用水和用试剂(如PBS)测出来的数据时很接近的,一般误差在0.003以内.用水做参比比试剂空白效果还好的原因可能是试剂不纯不清,有悬浮物,或者有颜色,影响了比色.
每次答完都没有人那个啥,这道题我会,可不可以先把分给了,就是先菜拿了这样写起来才有动力写过程,
测定方法上有算法的吧.吸光度的下降速率表示酶的活性,下降速率越快表明酶活性越大.当然是其它条件相同的情况下.有哪不清楚给我留言!
选择最大吸收波长,被测组分的灵敏度最高.吸光度最大的峰值附近斜率要比其他的区域要小,波长偏差Δλ对应的吸光度偏差ΔA当然也比别的区域要小,减小实验误差.
紫外吸收法原理大多数蛋白质由于有酪氨酸和色氨酸的存在,在紫外光280nm有吸收高峰,可以进行蛋白质含量的测定.但是核酸在280nm也有吸收,干扰测定,不过核酸的最大吸收峰在260nm.Warburg等
蛋白质氨基酸中苯环和大pai键吸收紫外线
对于猪来说豆类蛋白氨基酸种类较全牛.羊是复胃动物主要依靠瘤胃细菌产生的菌体蛋白直接食入大量蛋白质需考虑过瘤胃否则无法直接吸收(细菌利用了)而且可能引起瘤胃鼓胀等疾病
蛋白质溶液在275--280nm具有一个吸收紫外吸收高峰.核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波段有一强烈的吸收峰
在可能的波段内进行扫描,看吸收强度,强度最大的波长就是最大吸收波长
1.一定要扫描才得知最大的波长.注意控制扫描时样品浓的,虽然不影响最大吸收,但是太大了会平顶.扫描的话,你要做a空白溶剂扫描;b待测组分扫描;c;空白溶剂加杂质扫描;d空白+杂质混在一起扫描.最关键的
共轭会导致紫外吸收红移,所以波长应该是C>A>B
峰最高,且较为平坦.
最主要的考虑的是多糖类物质和蛋白的干扰
色氨酸、酪氨酸,因为它们都是芳香族氨基酸,含共轭双键,色氨酸在280nm处,酪氨酸在275nm处.另外,苯丙氨酸也是芳香族氨基酸,但它的最大吸收峰在257nm处