质粒DNA应长期保存在水溶液中
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/10 19:05:19
非本人原创,转载自网络.认真看.质粒提取需要注意的提到了.溶液I,50mM葡萄糖/25mMTris-Cl/10mMEDTA,pH8.0;溶液II,0.2NNaOH/1%SDS;溶液III,3M醋酸钾/
一般有两种方法,一是用目的基因的特异性引物以重组质粒为模板,进行PCR扩增.看能否出现目的基因的扩增产物.还有一种是将纯化的质粒进行酶切,因为目的基因连接到载体质粒上时两边都带有人工添加的酶切位点,只
T_DNA(可转移DNA)
没有特殊要求.实验室一般用玻璃细口瓶保存溶液,只有氢氟酸用塑料细口瓶(能与玻璃剧烈反应).再问:大苏打溶液是否不能置于空气中再答:大苏打溶液与空气接触短时间内不会有大问题。而大苏打固体可在空气中长时间
主要用来确定序列的首尾部分.因为测序的技术原因,测序开始的几十个碱基以及大概800个bp之后的碱基都是无效的,有效的只有中间几百个bp,具体为何这里就不赘述了.为了测定前面这几十个bp,我们就可以用到
TE为含EDTA的Tris-HCl(PH8.0)缓冲液:其中比较关键的成分是EDTA,日常环境中不可避免的存在DNase,而DNase的活性依赖于钙离子,并能被镁离子或二价锰离子激活.镁离子存在条件下
首先要知道,质粒是共价,闭合,环状的DNA(cccDNA).以常用的碱裂解法为例:当菌体在NaOH和SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒的cccDNA分子能够迅速复性,呈溶
细菌细胞内一种自我复制的环状双链DNA分子.能稳定地独立存在于染色体外,并传递到子代,一般不整合到宿主染色体上.应是非染色体DNA,即B一般质粒上都人工改造,植入目的基因启动子,和绿荧光蛋白(GFP)
在基因工程中,常用人工构建的质粒作为载体.人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体,如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等.常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101.pBR322含有抗四环素基因
建议你加入VC或着异VC,这些物质本身也对皮肤有好处,关键是密闭保存,避免接触空气中的氧气.如果可能,在进口处加个干燥管,内加吸氧剂,也是可以的.
血细胞细胞膜表面的蛋白质可以通过主动运输保钾排钠,低温保存下的血细胞没有这种能力,所以血浆中Na+下降,K+上升.
几个月还是可以的,但再长就不行了
能棕色瓶常温避光保存
不是处理含目的基因的DNA的酶和处理质粒DNA的酶必须是同一种酶.这样才能使目的基因和质粒露出相同的粘性末端,目的基因和质粒才能被DNA连接酶连接起来.
实验室用,需要保存在煤油或液体石蜡中.注意瓶子要密封,在阴凉处保存.工业品用煤油或柴油封装到金属桶中.也有的不用煤油而是用固体石蜡包裹然后封装.
用酚氯仿再次抽提.若对去除基因组DNA有要求,那么用核酸外切酶处理.再问:能不能再详细点???谢谢
因为质粒是环状的DNA片段,具有自动整合能力,也就是说,只要让质粒进入细菌细胞内后,就万事OK了,他会随着细菌DNA的复制偷偷的自己整合进去.而让他进入细胞的关键就是用钙离子溶液,使他变成感受态细胞,
碱性条件下,染色体DNA双螺旋结构解开而变性,质粒DNA的氢键断裂但两条互补链彼此缠绕.恢复中性时,染色体DNA难以复性,质粒DNA分子很快复性,离心时染色体DNA与细胞碎片一起被沉淀出来,而质粒DN
如何遗传?重组质粒,即基因载体.是一个复制子,在细胞内可以自主复制,细胞分裂时,质粒随机分配进入子细胞,类似细胞质的母性遗传(如线粒体、叶绿体等).如何检测?质粒的检测因质粒性质不同而不同,一般人工质
以东盛生物的为例bufferP1:除去RNAbufferP2:裂解细胞bufferP3:沉淀DNAbufferWA、bufferWB:都是洗涤液(这两个之间有什么区别我也不清楚)TE:溶解DNA.