pcr 内参ct值小 样本ct值大
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/12 14:58:12
看看你的GAPDH引物Tm多少,有可能是因为PCR条件适合目的基因引物对而不适合内参引物对吗?再问:不知道,我是个新手什么都不懂再答:那么童鞋,你还是找一个师兄师姐前辈高人带一下。网上这样问很难问出来
这个值与肝癌有什么关系?能不能测定肝癌处于哪个阶段?有张CT影像报告单,内容如下:检查所见:平扫所见:肝左叶缺如.肝右叶边缘欠光整,肝右叶多发结节,后段可见大片状不规则低密度影,边缘欠清晰,其内可见更
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样
阈值和基线的设置肯定会影响Ct值,你可以采用每次反应完后软件自己选定的阈值.你也可以手动调整,但是如果你是相同的模板,做不同反应,那你必须使两次实验的阈值和基线调到相同.使用相同的标准品,才能减小不同
理论上是越一致越好.如果有很大的差异,说明实验有较大的误差,或者样本有降解.
通常情况下,我们认定为15到35CT比较合理,超过35个CT那么就算它没有扩增了,如果15之前起峰,那么就是模板浓度太高所引起的,如果发文章,那么建议你控制在15到35之间吧
仪器配套软件会直接给出来一个CT值,也可自己调节
在影像诊断学中,把空气的密度定义为-1000,金属密度定义为1000,中间分2000份,水的密度定义为0,CT值就是以这个标准计算出的值.用来鉴别组织成分等.
请问你做RealTimePCR做几个循环的?40个吗?40个循环的话,CT值在30左右很正常的啊,CT值30的话大概是10000copies,说明模板含量低嘛,定量定量就是要CT值有大有小的才有比较嘛
没有关系,可以继续按正常步骤计算.内参的CT值通常要控制在25-30,目的基因CT值高,只说明目的基因表达量比较低..没关系..
加样误差,或者浓度本来就低再看下你设置的基线是否不对再问:都是先配好mix液,混匀后再分加至每个孔的,应该误差不会很大吧(出现Ct值的大多在20左右)再答:有没有看看扩增曲线是否正常?或者你的模板质量
△△Ct=△Ct(试验样品)—△Ct(基准样品)△Ct(试验样品)=Ct(试验样品,目的基因)—Ct(试验样品,内参基因)△Ct(基准样品)=Ct(基准样品,目的基因)—Ct(基准样品,内参基因)2-
用内参的方式进行realtime定量是不需要考虑加样量和反转录效率的问题的,因为结果都是和内参比,和内参同多同少.realtime不准是很常见的事,rna降解、引物特异性差、模板太浓或太稀等等许多因素
不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的
看了你空间里的溶解曲线,你可以看到溶解峰的温度都很低,全在80以下,你扩出来的东西多半只是引物,你跑定量的时候有做NTC的孔吗,如果有做,可以对照NTC组和加了模板的组,溶解峰还是一样的话,那你扩出来
2-ΔΔCt法.定量的作用是比较两个或多个样本(前提是细胞数目要相等)基因表达量差异的,基因拷贝数/内参拷贝数只是一个样本的相对定量值.内参的作用只是消除样本间细胞数目的差异.
CT值:0Hu是水-1000是空气1000是骨头-70---90是脂肪30-50是软组织.CT值就为了了解片子上某个部位到底是什么成分.其余没什么用
ct值是表示身体组织密度的.做ct是为了准确判断可以测ct值.ct值越大表示密度越大.其中以水得ct值为0.密度大于水ct值为正,密度小于水ct值为负.空气的密度最小ct值为-2000,骨质密度最大c
CT值代表X线穿过组织被吸收后的衰减值.每种物质的CT值等于该物质的衰减系数与水的衰减系数之差再与水的衰减系数相比之后乘以1000,即某物质CT值=1000×(u—u水)/u水,其单位名称为HU(Ho
△Ct(n)=Ct目的基因(n)-Ct内参基因(n);△△CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1);然后算出2-△△CT;标准差我是同一处理做了3个平行算出来的.没法下标,用括号处理,