PCR对照组是否会产生引物二聚体
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/13 00:24:55
同楼上,当初我问老师这个问题时,他说大学才学这么深
Oligodt不需要设计,用试剂盒里面的就行.如果你RT的引物想用自己的,那你需要扩增的基因序列应该是明确的吧.RT的时候'引物没太多的选择性,mRNA序列跟反义链配对,因此RT的引物要根据正义链(就
引物3'端末端有互补序列,这样造成引物以引物为模板进行延伸,造成引物二聚体.
完全可以,PCR长度从50bp到数百都可以,不止局限于150-300个碱基对.楼上说的有道理,但是有一点要注意,最好计算一下扩增片段的Tm值,这样做溶解曲线的时候,光有一个峰还不够,而且得到的TM和你
一般PCR使用两条引物,前后各一条,与模版DNA结合上后,前后的引物形成复制起始位点,共同向中间扩增,直到连上,一次扩增完成.
在聚合作用的起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序列.在核酸化学中,引物是一段短的单链RNA或DNA片段,可结合在核酸链上与之互补的区域,其功能是作为核苷酸聚合作用的起始点,
用PP5.0或oligo软件.网上有很多说明书的,操作十分简单再问:等于白说
关键就是这个引物的设计,如果你能设计好并且成功RT-PCR,那就没问题了.
是一段特定的DNA序列,可以在退火温度下和模版链特异性结合,引导PCR体系中的dNTP根据与模版链碱基配对原则延伸出一条新的链.引物的序列是根据你要扩增的DNA序列而设计的.
引物是核算复制的起点片段,体内是RNA,PCR技术使用的是DNA片段,将来成为扩增之后的DNA组成部分,位于其一端,引物的量决定扩增所达到的DNA量再问:假如我要研究DNA中的一段,选择引物也是可以的
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的片段
一般要20个碱基的长度,一对,要防止形成发夹.
pcr是体外扩增,没有载体,你以为是在细胞里面呀,PCR体系温度变性时94℃,40秒蛋白质早就变性了,PCR是引物直接开始和模板DNA结合,在taq酶作用下延伸.我这两天正在做这个实验呢.没错!
随机引物PCR如果是RAPD的话,是要用单引物的一般是10bp大小的,CG含量要高于60%.
用primerpremie
在两个外显子上设计上下游引物就可以再问:跨外显子是吗?再答:是的,在相邻的两个外显子上就好。
博凌科为-为你是这样,其实片段在一定的范围最好,为什么呢,太长了,片段多,可错配几率就很高,举个例子:两条高特异性的引物如果串成个长的引物,它的错配率不是高了一倍,但为什么说在一定范围呢,因为错配和T
没事,这个可以,你应该是把设计的上下游引物都进行了比对,前两个比对结果应该就是上游、和下游引物,假设你第一个结果是上游,第二个结果是下游.那么第三个结果也就是下游比对结果,下游结合的位置距离上游、下游
否生物体内切除引物是因为体内DNA合成用的引物是RNA;而PCR技术用的引物是DNA,所以不必切除.
可以在引物上添加不配对的碱基,但是在引物的3‘端,至少有三个碱基是严格配对的.但是这样的操作主要是为了添加酶切位点或者flag等.Tm值是根据两条链的退火情况来计算,不配对的碱基不算在内,所以你添加不