PCR扩增多少个循环后出现目的片段长度的双链-搜答案-大师作文网

不需要.加入的原料有dATP,没有ATP.

你是说PCR产物电泳出现多带或产物没序后有多种序列?总之,有可能是引物退火温度太低,错配的结果.建议提高退火温度或换引物.

一般情况下,循环30次产生的基因片段就够用了,在进行下去酶的活性可能也不会太好

如果是双链,第一次循环要1对引物,第二次要2对,第三次4对,第四次要8对.总共15对.上下游引物各15条.如果是单链,第一次循环要1条引物,第二次要1对,第三次2对,第四次要4对.总共7对半.上下游分

冷却的时候才能使得引物和模板结合啊.这一步也叫退火.

第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforwardprimer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backwardprimer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制

引物本来就是单链的.书上画成双链才怪.PCR所用的DNA聚合酶只能顺着已经存在的一小段DNA的尾巴来接着合成,它不会自己起头.引物就是这么一小段用来起头的DNA.DNA本身很长很长,我们扩增时,只能扩

引物的功能是作为核苷酸聚合的起始点,引导DNA的合成.能设定循环次数,及控制复制次数.PCR循环次数主要取决于模板DNA的浓度.一般的循环次数选在30～40次之间,循环次数越多,非特异性产物的量亦随之

只要有目的基因的片段存在,无论是质粒还是基因组还是其他类型的DNA片段,都是可以的.

我是ls小号,度娘审核答案你看这个图,不就是在一段DNA上截吗?就是说复制出的DNA双链中有的不是目的基因, 这句话我不太懂.在不考虑DNA外显子和内含子以及复制时出现的染色体变异等等情况下

PCR扩增的目的基因可以跑电泳后,把目的DNA带纹切下来,回收就可以了；阳性克隆的目的基因,可以先对这个克隆液体培养后提取质粒（如果是重组在质粒载体上的）或染色体（如果是YAC之类的）,酶切后电泳,回

需要.但需要注意的是从基因库中提取的目的基因一般只还有外显子,而没有内含子.

非特异性扩增优化下pcr条件在不行的话就重新设计引物

1.有没有你的程序尤其是温度.2.引物没问题?3.样品DNA没问题?4.染色没问题?（最好是电用完以后染色比较安全,15-20min最佳）

用dl2000marker的话,在750bp（从上往下第三条带）和1000bp（第四条带）之间,

可以,没问题.

2个办法1.直接使用提纯试剂盒,去掉其他成分,或者跑胶后切胶提纯2.克隆到载体质粒,再进行其他操作

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

这个问题就比较难了高中如果考到这个算难题其实你只要一步一步推就能够解出解法：复制四次,共有16个DNA分子,其中只含引物A的DNA片段有1个,由母链和引物A形成,只含引物B的DNA片段也只有1个,由母

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间