pcr的ct正常
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/29 09:28:00
看看你的GAPDH引物Tm多少,有可能是因为PCR条件适合目的基因引物对而不适合内参引物对吗?再问:不知道,我是个新手什么都不懂再答:那么童鞋,你还是找一个师兄师姐前辈高人带一下。网上这样问很难问出来
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样
阈值和基线的设置肯定会影响Ct值,你可以采用每次反应完后软件自己选定的阈值.你也可以手动调整,但是如果你是相同的模板,做不同反应,那你必须使两次实验的阈值和基线调到相同.使用相同的标准品,才能减小不同
你好,这个要在开始的时候选择“相对定量”模式,软件才会给出扩增效率
这个很简单啊.你做了一次实验,得到的样本做了一次PCR,得到了一次的相对定量(设对照组为1).然后重新做实验,再做PCR,又得到一组,这样至少重复3次,就有3组相对定量了.计算标准差对照组的标准差:取
理论上是越一致越好.如果有很大的差异,说明实验有较大的误差,或者样本有降解.
就是cyclethresholdvalue的standarddeviation(STD.DEV).你做realtime的时候同样的样品肯定有replicate或者triplicate的.这个指标就是检
通常情况下,我们认定为15到35CT比较合理,超过35个CT那么就算它没有扩增了,如果15之前起峰,那么就是模板浓度太高所引起的,如果发文章,那么建议你控制在15到35之间吧
仪器配套软件会直接给出来一个CT值,也可自己调节
CT在颅脑疾病诊断上的评价:CT的密度分辨力高,能显示常规X线检查无法显示的器官及其病变,检查方便,成像速度快,对颅脑疾病具有很高的诊断价值.1.颅脑损伤其主要表现为脑出血、脑挫伤及脑水肿、脑肿胀,C
http://www.bio168.com/mag/402A1123371/5A1AB126109.html东胜创新的一个实例.
请问你做RealTimePCR做几个循环的?40个吗?40个循环的话,CT值在30左右很正常的啊,CT值30的话大概是10000copies,说明模板含量低嘛,定量定量就是要CT值有大有小的才有比较嘛
放心好了不会有事的,心理作用,医用射线对身体有害,是一定程度上对白细胞的损害,照你这么说,放射科大夫不就吐死了?没事的,可能做CT时候紧张了.
加样误差,或者浓度本来就低再看下你设置的基线是否不对再问:都是先配好mix液,混匀后再分加至每个孔的,应该误差不会很大吧(出现Ct值的大多在20左右)再答:有没有看看扩增曲线是否正常?或者你的模板质量
你一次实验做的数据,内参可以得到几个CT值,目的基因也会得到几个.这样的话,根据平均的CT值,就会得到一个倍数(相对量).实验肯定不会只做一次吧,至少重复3次以上.这样就会得到3个以上的倍数了.3个以
△△Ct=△Ct(试验样品)—△Ct(基准样品)△Ct(试验样品)=Ct(试验样品,目的基因)—Ct(试验样品,内参基因)△Ct(基准样品)=Ct(基准样品,目的基因)—Ct(基准样品,内参基因)2-
用内参的方式进行realtime定量是不需要考虑加样量和反转录效率的问题的,因为结果都是和内参比,和内参同多同少.realtime不准是很常见的事,rna降解、引物特异性差、模板太浓或太稀等等许多因素
看了你空间里的溶解曲线,你可以看到溶解峰的温度都很低,全在80以下,你扩出来的东西多半只是引物,你跑定量的时候有做NTC的孔吗,如果有做,可以对照NTC组和加了模板的组,溶解峰还是一样的话,那你扩出来
你参考一下我以前的回答再问:原来是ylgtwcat老师,久仰久仰。下过您的文库里的文章。您说“一般都是相对量。则用deltadeltaCT方法来计算。举例如下:基因A:deltaCT=20-18=2。
△Ct(n)=Ct目的基因(n)-Ct内参基因(n);△△CT(n)=△Ct(n)-△Ct(1);然后算出2-△△CT;标准差我是同一处理做了3个平行算出来的.没法下标,用括号处理,