醋酸纤维膜电泳的条带位置与宽度与染色时间有关吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/11 00:26:58
图谱不齐条带扭曲什么的可能是纤维膜质量不好,缓冲液有问题,电泳电压电流不稳定;拖尾或过密可能是电泳时间不足;要不就是点样没点好,点样时薄膜上还有水;透明后膜不透彻可能是染色时间太长了吧,我觉得不到10
存在两种可能性,第一,引物设计错误,可以将引物和参考序列进行拼接后看看能不能顺利拼接,以及拼接之后的目的片段长度;第二,可能是非特异扩增,这个时侯如果确定引物位置没有问题,可以调整退火温度,以及PCR
醋酸纤维素薄膜本身就像包装药片的铝塑纸一样,它是由一层薄薄的聚乙烯和压附在其上的醋酸纤维素酯构成的.光滑一面是聚乙烯一面,唯有粗糙面是醋酸纤维素酯的一侧.所以自然要点在粗糙面上了.①电泳后区带界限清晰
蓝色条带分别是溴酚蓝和二甲苯青FF(请注意不是二甲苯氰).溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同.希望能够对你有所帮助.
中间的是RNA
纤维素模的一面用板醋酸酐浸泡来制作醋酸纤维薄膜,醋酸面是光滑的而且另这一面的纤维素间隙减小(蛋白质进不去),纤维素面是粗糙的(蛋白质进得去),所以点样在粗糙面,且电泳时朝下(防止因重力作用侵入到醋酸纤
一、原理醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维素薄膜作为支持物的电泳方法.带电颗粒在电场力作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象称为电泳.由于各种蛋白质都有特定的等电点,如将蛋白质置于pH值低于其等电点的溶液
深浅表示含量的多少宽度没啥表示吧是你泳道大小决定的
①电泳后区带界限清晰;②通电时间较短(二十分钟至一小时);③它对各种蛋白质(包括血清白蛋白,溶菌酶及核糖核酸酶)都几乎完全不吸附,因此无拖尾现象;④对染料也没有吸附,因此不结合的染料能完全洗掉,无样品
结合了sds的蛋白一般带负电吧,在负极点样通电以后蛋白才会因为排斥往正极走啊
以醋酸纤维薄膜为支持物,浸入ph8.6的缓冲液后吸去多余液体.将微量血清点于膜上,经电泳后,将薄膜置染色液中使蛋白质固定并染色,洗去多于染料.将膜条烘干,再将其用透明液进行透明处理.用光密度计或凝胶成
1)由于电泳漆的特点,合成的树脂必须是水溶性的.为了达到树脂水溶的目的,在聚合物分子链上常需引入一定量的强新水性基团.如:羧基,羟基,醚基等.由于酯键、羧基和这些亲水性基团的存在,所以阳极电泳漆的耐碱
首先越靠近点样孔,分子量越大,如果你加了marker,可以根据厂家给的那张maker的图推测样品的大小,一般来说,在同一水平位置的分子量大致相同.没什么特别高深的技术含量分子量与亮度和长度无关的,亮度
一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热(90度以上)一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大(不一定是目标产物)再问:我做的是菌落PCR电泳检测结果,我
1将准备好的薄膜划线面朝下,与巴比妥——巴比妥钠缓冲液中充分浸透(约30min)2,电泳开始的10min内电流调为0.3mA/CM膜宽,10min后调至0.6mA/cm膜宽.电泳60min,待电泳区带
主带显著的情况下,很可能是引物聚合体.如果没有出现显著的你想要的主带,则是非特异扩增产物.第一种情况没事不用理会,第二种情况需要筛查模版中与引物的非特异性互补区,重新设计引物,或者升高退火温度试试.
可以依照以下几个线索分析:1,薄膜本身的质量问题(涂层不均匀等),2,点样技术问题,3,电压电流控制问题,4,样品本身是否有降解、污染;5,实验过程其他可能影响结果的问题,如平衡时间、浸泡时间、染脱色
用迁移率算迁移率=蛋白质分子的移动距离:前沿分子的移动距离迁移率(m),蛋白质分子量(M)lg(M)=-bm+k其中b和k为常数也就是说迁移率(m)与蛋白质分子量(M)的对数成反比实验中用已知蛋白质分
RNA在提取过程中和保存期间非常容易被RNA酶降解,提取过程得非常小心,保存期间也得加RNA酶抑制剂,不知道紫外分光光度计检测时含量和纯度如何,及时被降解,也应该有拖尾才对,可能是浓度太低,建议加大上