RT-PCR要用的试剂和耗材
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/18 05:04:32
因为RT-PCR的模版是单链的RNA,一种引物就够了,而常规PCR的引物是双链DNA,需要上下游引物从两端同时扩增.
聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术.它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要
试管.离心管.枪头.乙醇、乙醚、吸水纸.擦镜纸.琼脂、淀粉、可溶性纤维素.牛肉膏.蛋白胨.电炉子.载玻片.盖玻片、镊子、刀片、解剖盘.解剖针、福尔马林、生理盐水、桶装水、中性红、醋酸、氯仿、磷酸二氢钾
在做QRT-PCR时,一定要有内参,即在PCR时,每个标本都要做对应的内参,而且每次都是看家基因,一般用bate-actin,有时也用GAPDH.内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但rea
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起码需要吸头,移液器,离心管,PCR板和管、PCR使用的酶,电泳需要的琼脂糖,EB染料,做克隆需要蛋白胨,琼脂粉等,配液需要锥形瓶、烧杯、量筒、试剂瓶等!
PCR这里是指常规的PCR吧?就是以DNA为模板,dNTP为原料,在TaqDNA聚合酶的作用下,扩增DNA.RT-PCR即Reversetranscription-PCR,顾名思义就是讲mRNA通过反
Real-timePCR中文译作“实时聚合酶链反应”,是一种最新发展的定量PCR技术.该技术借助于荧光信号来检测PCR产物,一方面提高了灵敏度,另一方面还可以做到PCR每循环一次就收集一个数据,建立实
样品可以用细胞也可以用细胞里提取的DNA试剂DNA聚合酶(依赖于你的目的选择普通Taq酶还是高保真Taq酶)DNA聚合酶附带的缓冲液,MgCl2(可能有可能没有,没有的一般是公司添加到额缓冲液里了)d
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实时定量PCR对技术要求比较高,技术上国外走在前列.但现在我国生产的PCR技术也突飞猛进.进口PCR和国产的PCR仪,在技术和使用性能上基本上没有多大的差别,比如:升降温速率,孔间温差,温度均一性,梯
做RT首先要知道第一步是提取细胞内的总RNA,然后将RNA加入反转录酶进行PCR.,反转录还是遵循碱基互补配对原则,以mRNA为母链合成子链cDNA,所以只能是单链结构,然后下一次循环时候则会以合成的
RT-PCR一般指的是反转录PCR.
即nestedPCR,是指利用两套PCR引物(巢式引物)对进行两轮PCR扩增反应.在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增.由于巢式PCR反应有两次PCR扩增,从
RT-PCR现在一般指反转录PCR,有时候也被说成Real-time-PCR就是实时定量PCR;Real-time-PCR就是实时荧光定量PCR,现在标准的说法是qPCR,就是定量PCR.
跟一般的PCR一样哇,PrimerPremier、Oligo都可以哦.
1,是不是阴性要看医院给的参考值是多少,小于就是阴性,大于就是阳性.每个医院采取的试剂盒不一样,正常的标准就不一样,有小于500拷贝的,比如你的这个,有小于1000的,还有小于10000或100000
北京基诺莱普实时荧光定量PCR检测专家.普通的RT反应跟QPCR的RT反应是一样的,没有区别,只要你在后续试验中加入含SYBR的MIX就可以了.
由一条RNA单链转录为互补DNA(cDNA)称作“逆转录”,由依赖RNA的DNA聚合酶(逆转录酶)来完成.随后,DNA的另一条链通过脱氧核苷酸引物和依赖DNA的DNA聚合酶完成,随每个循环倍增,即通常
一般像高校、科研单位、生物工厂,只要是做生物实验的就能用到.