大师作文网sds-page的浓缩胶PH
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/11/11 00:11:00
SDS可以中和蛋白质表面电荷,并破坏蛋白质构象,使其成为线性.这样分离时只和蛋白质的分子量有关,而与构象等无关.
这个倍数是指你的缓冲液母液相比上样时最终浓度的倍数.母液总是要比你的最终浓度高,因为它会被你的蛋白质样品稀释.所以2X就是2倍的母液,与同体积的蛋白质样品混合以后上样.实际操作上,当然不是根据缓冲液体
为什么又问一遍呢?是（聚）丙烯酰胺浓度啊,当然其他物质比例也要作相应的调整,聚丙烯酰胺胶本身的分离能力是由聚丙烯酰胺提供的,正如琼脂糖凝胶的分离能力是由琼脂糖提供的一样.
胶没配好吧,没混匀,有气泡,都有可能
可以考虑如下几个因素1.玻璃是不是洗干净且烘干了2.倒胶时胶是否刚配好混匀,没有凝固3.槽底和四周是否密合,没有漏胶4.水或有机溶液封胶面时,是否沿一侧轻轻加入小心放平5.其它原因,未凝固时剧烈摇动?
一、可能是玻璃板没有加紧二、浓缩胶没有凝固好,灌胶的问题三、电压是否大了?我们常用浓缩胶80v,30min.灌胶的问题可能性比较大,祝实验顺利
建议看看汪家政的《蛋白质技术手册》,上面写得比较详细AMERSHAM的PROTOCOL:UndernativePAGEconditions,polypeptidesretaintheirhigher-
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS（十二烷基磺酸钠）,SDS能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,强还原剂能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,蛋白质在一定浓度的含
电泳缓冲液是Tris-甘氨酸电泳缓冲液.上样缓冲液是SDS缓冲液,需要加入Tris-Hcl,DTT,SDS,溴酚蓝和甘油.分离胶配制过程中的缓冲液是PH8.8的Tris-Hcl浓缩胶配制过程中的缓冲液
page代表聚丙烯酰胺凝胶电泳,算是一类总称.所以page是包括了sds-page（十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）.除了sds-page还有native-page（非变性聚丙烯酰胺凝胶）,区别在
检查一下AP和TEMED1.AP有可能是吸水结块了或者是被氧化了配的时候尽量去中间的部分可以试试加大AP的量2.TEMED吸水或氧化了看看颜色是否已经很黄了如果是就要换新的3.可以试试将胶放入烘箱30
你可以用12%的胶浓度,如果marker是fermentas家的SDS非预染marker（批号SM0431）的话,可以看到116kd66.2kd45kd35kd25kd18.4kd14.4kd,这样你
浓缩胶凝的快没有太大影响,一般三四十分钟就可以.如果怀疑效果,可以检查一下单体是否发生变化,单体要低温避光保存.
作用原理聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构,具有分子筛效应,它有两种形式,一种是非变性聚丙烯酰胺凝胶,蛋白质在电泳中保持完整的状态,蛋白在其中依三种因素分开：蛋白大小,形状和电荷.而SDS-PAGE仅根据蛋
用于分离蛋白质和寡糖核苷酸.
没有的,所有的蛋白质都带上过量的负电荷,只是与每个蛋白质本身分子量大小有关
直接放四度.用保鲜膜包好.
1,看目的蛋白的大小一般actin以下的可以跑12胶红线左右可以用12或10跑几百的很大的用6的胶小蛋白12的10的一般都能跑如果不考虑效率的话...能跑多慢跑多慢,越慢跑的越好看2,看样品浓度多少,
在SDS－PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris－HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9；而电泳缓冲液使用的Tris－甘氨酸缓冲系统.在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸