westen 跑电泳的时候为什么要用冰块?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/09 16:29:24
有时候溶解曲线看上去是很特异的,而电泳却能跑出两条带;加内参是为了做表达比对,跟内参比,这样才能知道是高表达还是地表达,也可以作为判断PCR反应过程是否顺利的依据.
28S、18S和5S是由一个转录本剪接的,在细胞内分子数相等.分子的nt数之比等于电泳时亮度之比.28S≈3500nt18S=1869nt5S≈120nt28S:18S≈2:118S:5S≈15:1所
westernblot检测是用特定抗体检测特定蛋白,BCA法是检测蛋白浓度,即使BCA法检测蛋白浓度高,但也不一定有你检测的蛋白啊?还有你要保证你westernblot操作没问题哦,最好做个内参.
1)你应该是没有明白什么是包涵体,简单的说就是翻译的蛋白没有正确折叠而聚集在一起形成的,主要的是疏水作用.实际上就是很多个蛋白分子,这些蛋白并不是交联在一起的,用高浓度的尿素和盐酸胍可以使他们变性,解
我跑过700bp的电泳,用1.5%-2%的胶都是可以的.电压在120-130V之间,大致时间在30-40分钟.根据你们不同电泳仪的设置,可以观察溴酚兰条带来判断时间.一般溴酚兰接近胶的末端时,就可以了
取PCR产物加上样缓冲液于1.6%或1.8%琼脂糖胶上电泳,稳压50-100V扩增产物在用5×TBE配制的2.0%的琼脂糖凝胶中电泳分离. 参考来源:百度文库--ISSR分子标记的实验原理及
http://zhidao.baidu.com/question/1953905.html
loadingbuffer的功能主要有两个.第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降
可能是梳子不齐,或者是胶边上和中部的厚度不一样!
若是普通PCR,做完以后要通过电泳鉴定目的片段的大小是否为想要的,条带的亮度可以反映模板的两是否足够,也可以看是否存在引物二聚体,借此优化PCR条件和体系若是RealTimePCR,尽管可以直接看显示
SNP是单碱基突变,只人群中这一位点存在2个或以上可能的碱基,一般用基因频率表示在人群中携带这种突变等位基因的频率.人基因组是双倍体,存在三种基因型——不携带突变,携带单突变和双突变.对其中的双链DN
可能PCR反应进行的不好,没有得到充足的DNA片段建议改善反应条件,重做一便.
如果你切的是PCR产物的两端,那么跑胶是看不出来区别的.选择这样只是因为方便,酶切的效率要取决于保护碱基、酶的质量等等,一般根据经验切完之后,挖胶回收,如果产物带很特异的话,直接PCR产物回收也可以(
电泳的目的是看DNA片段的长度,而电泳上DNA移动速度除了受片段长度的影响还受到其结构的影响.让DNA变性,所有样品都是线形DNA.这时所有电泳上所有DNA的移动速度只和其长度有关.
用dl2000marker的话,在750bp(从上往下第三条带)和1000bp(第四条带)之间,
总共三条带,从大到小依次是28S,18S,5S,亮度依次递减.正常情况应该是28S比18S条带亮,宽度是它的2倍,5S则很淡
应该会出现很多条带细胞内不仅有mRNAtRNArRNA还有一些小RNA如snRNAsnoRNAscRNA如果再加上线粒体内转录的更多
用琼脂糖凝胶就行,用TAE电泳缓冲液,应该是三条带,或者是抹带.再问:是和总RNA一样的条带么?再答:三条带是核糖体RNA,就是所谓的rRNA,占细胞总RNA的80%,你所说的双链RNA难道是病毒的么
当然不一样啦RNADNA都可以用EB或者genefinder蛋白的话不需要染料电泳完如果想直接再胶上看就用考马斯亮蓝染色如果要特异性的检测某个蛋白就转膜后孵育抗体然后显色
题目不太清楚.你的样品是什么?会不会不纯含有其他蛋白.染色方法对不对?如果所需验证的蛋白含量很少,银染分辨率比考然高.会不会跑胶跑过头了?