植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:语文作业 时间:2024/09/27 21:30:15
植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,大恩不言谢
植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显子之间,想问下是不是这个原因(别笑我问题很幼稚,我只是一个大三的),还有就是每次p时在最前面大概100bp左右都有很亮的片段,我是用超表达和cDNA的两対引物两两配对的,结果4个在最前面都有很亮的条带,也不拖尾,很漂亮,不知道那个是什么,有人说是引物二聚体,我不确定,
植物基因组已经提出来了,PCR一直没有p出来,我的引物是根据cDNA设计的,问题可能是因为引物刚好选在两个外显子之间,想问下是不是这个原因(别笑我问题很幼稚,我只是一个大三的),还有就是每次p时在最前面大概100bp左右都有很亮的片段,我是用超表达和cDNA的两対引物两两配对的,结果4个在最前面都有很亮的条带,也不拖尾,很漂亮,不知道那个是什么,有人说是引物二聚体,我不确定,
我想你可以从三个方面去找原因:
1.基因组的提取是不是真的没有错误.
2.引物的设计是不是正确,如果是选在两个外选子之间,那样会有特异的序列(外显子和内含子连接处序列有特异性)
3 PCR程序有没有优化,如果前面两点都没问题,那么你可以考虑做一下优化.
前面100bp一般都会是引物二聚体,你可以看看你设计的引物之间是不是互补性很强.
再问: 可以详细点么,具体特异性是什么样的,感恩不尽,或者这方面的文章也行,我现在真是是一头雾水
再答: 一般的分子生物学书籍以及基因工程的书就能找到原理,还可以问下教基因工程的老师,就差不多了
1.基因组的提取是不是真的没有错误.
2.引物的设计是不是正确,如果是选在两个外选子之间,那样会有特异的序列(外显子和内含子连接处序列有特异性)
3 PCR程序有没有优化,如果前面两点都没问题,那么你可以考虑做一下优化.
前面100bp一般都会是引物二聚体,你可以看看你设计的引物之间是不是互补性很强.
再问: 可以详细点么,具体特异性是什么样的,感恩不尽,或者这方面的文章也行,我现在真是是一头雾水
再答: 一般的分子生物学书籍以及基因工程的书就能找到原理,还可以问下教基因工程的老师,就差不多了
您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带?
反转录PCR引物如何设计?已经得到cDNA第一链,引物设计是以cdna为模版,设计上下游引物吗?
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pcr引物设计是根据原基因的编码链 还是模板链 有关系嘛
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