如何确定cDNA中是否还含有基因组DNA?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/19 10:15:49
如何确定cDNA中是否还含有基因组DNA?
cDNA和基因组的大小不一样,可以电泳区分.
但这和电泳DNA染料的灵敏度有关,最好的办法是用在RNA的时候就确定,
建议用RNA作为模板直接进行PCR,
如果和阴性对照结果一样,才能肯定没有DNA污染.
再问: 我现在的问题是电泳RNA无基因组DNA,而跑actin时在700-1000bp有弥散带,目的条带200左右。我怀疑是未消化干净DNA,但有检测不到。用RNA和阴性对照都做了。结果与阴性对照一致。谢谢!再帮我想想是什么原因。
再答: 还是建议弥散的几个模板优化PCR反应体系条件。
但这和电泳DNA染料的灵敏度有关,最好的办法是用在RNA的时候就确定,
建议用RNA作为模板直接进行PCR,
如果和阴性对照结果一样,才能肯定没有DNA污染.
再问: 我现在的问题是电泳RNA无基因组DNA,而跑actin时在700-1000bp有弥散带,目的条带200左右。我怀疑是未消化干净DNA,但有检测不到。用RNA和阴性对照都做了。结果与阴性对照一致。谢谢!再帮我想想是什么原因。
再答: 还是建议弥散的几个模板优化PCR反应体系条件。
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