作业帮 > 生物 > 作业

PCR引物怎么合成?DNA的PCR扩增技术中的引物.

来源：学生作业帮 编辑：大师作文网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/15 22:14:52
PCR引物怎么合成?
DNA的PCR扩增技术中的引物.
PCR引物怎么合成?DNA的PCR扩增技术中的引物.
这是最重要的一步.理想的,只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些条件
1)\x05足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的primer同样会降低特异性,并且降低产量
2)\x05GC% 40%~60%
3)\x055'端和中间序列要多GC,以增加稳定性
4)\x05避免3'端GC rich,最后3个BASE不要有GC,或者最后5个有3个不要是GC (有人说：3' 端最好是 GC/CG/CC/GG.)
5)\x05避免3'端的互补,否则容易造成DIMER
6)\x05避免3'端的错配
7)\x05避免内部形成二级结构
8)\x05附加序列(RT site,Promoter sequence)加到5'端,在算Tm值时不算,但在检测互补和二级结构是要加上它们
9)\x05使用兼并primer时,要参考密码子使用表,注意生物的偏好性,不要在3'端使用兼并primer,并使用 较高的primer浓度(1uM-3uM)
10)\x05最好学会使用一种design software.PP5,Oligo6,DNAstar,Vector NTI,Online design et al.
pcr技术中的引物是怎么来的?得到的dna分子有没有引物 PCR扩增 正向引物,反向引物是什么?怎么结合的? PCR技术扩增目的基因中的引物有什么作用? PCR扩增DNA的操作里 为什么要用引物? PCR技术中的引物是什么 PCR技术中的引物是什么? 使用PCR扩增以下DNA模版中的基因1,需要的一对引物序列是 PCR扩增时引物的位置 引物是否只是PCR扩增中的目标链,它与扩增产生的DNA链序列有什么区别? PCR技术中使用的引物是RNA还是DNA? microRNA的茎环引物及其PCR扩增的上游引物怎么设计? 利用PCR技术扩增目的基因,引物是什么?