设计引物目的基因前延后延
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/07 11:25:58
设计引物目的基因前延后延
我设计引物,后期做表达.
想要把目的基因前加500bp及后加500bp
现在的问题是,我在查结核杆菌全长时发现两个连续的基因之间有一些bp的间隔
现在的问题是,我是按基因前延后延还是按
前面减500,后面减500啊?
我设计引物,后期做表达.
想要把目的基因前加500bp及后加500bp
现在的问题是,我在查结核杆菌全长时发现两个连续的基因之间有一些bp的间隔
现在的问题是,我是按基因前延后延还是按
前面减500,后面减500啊?
那个数字就是你所要基因的起始和终止位点,你如果想在前后各加500bp,应该讲起始位点减500,终止位点加500.
再问: 可是连续的两个基因中间存在的那些bp是什么啊? 引物根据这些bp的设计合理吗?
再答: 非编码区啊。基因组中的非编码区很多的。根据这些非编码区设计引物是否合理取决于你引物的用途,为什么你要前后各延伸500bp?
再问: 就是后期要做蛋白表达,不加长的话P不出目的基因全长吧。。。 只是想找个合适的引物, 看网上说还要防止移位,是不是意思是酶切位点到ATG必须是3的倍数 啊?
再答: 如果你只是做蛋白表达的话,只要扩增产物包含完整的基因就可以,实在没必要向两端各延伸500bp。 移位通常是在做融合蛋白的时候要考虑的问题,如果你不在编码序列内做操作的话,不需要考虑移位问题。
再问: 我的目的基因是744bp,也就是说,PCR产物必须大于744就行了吧? 我设计的上游引物在目的基因前60bp左右,下游引物在目的基因后300bp左右 非常感谢您的耐心解答
再答: 下游引物为什么那么靠后?
再问: 分数比较高,有个后25bp左右的,但是有Dimer最好尽量靠近目的片段吗?(目的基因是501-1245)
再答: PCR片段短一些容易扩增。 这个位于1269的下游引物挺好的,Tm值和GC含量和上游引物都般配,分数也不低,85分,那点DIMER不算什么。你的引物还没加酶切位点?
再问: 可是连续的两个基因中间存在的那些bp是什么啊? 引物根据这些bp的设计合理吗?
再答: 非编码区啊。基因组中的非编码区很多的。根据这些非编码区设计引物是否合理取决于你引物的用途,为什么你要前后各延伸500bp?
再问: 就是后期要做蛋白表达,不加长的话P不出目的基因全长吧。。。 只是想找个合适的引物, 看网上说还要防止移位,是不是意思是酶切位点到ATG必须是3的倍数 啊?
再答: 如果你只是做蛋白表达的话,只要扩增产物包含完整的基因就可以,实在没必要向两端各延伸500bp。 移位通常是在做融合蛋白的时候要考虑的问题,如果你不在编码序列内做操作的话,不需要考虑移位问题。
再问: 我的目的基因是744bp,也就是说,PCR产物必须大于744就行了吧? 我设计的上游引物在目的基因前60bp左右,下游引物在目的基因后300bp左右 非常感谢您的耐心解答
再答: 下游引物为什么那么靠后?
再问: 分数比较高,有个后25bp左右的,但是有Dimer最好尽量靠近目的片段吗?(目的基因是501-1245)
再答: PCR片段短一些容易扩增。 这个位于1269的下游引物挺好的,Tm值和GC含量和上游引物都般配,分数也不低,85分,那点DIMER不算什么。你的引物还没加酶切位点?
一段目的基因,帮忙设计引物.
已知目的基因全长,如何设计引物克隆全长
PCR引物设计中的问题、保守序列在目的基因内、但是引物为什么在保守序列设计?
请问大家怎么选取一个目的基因的大小来设计引物?
关于引物和目的基因的关系.针对某基因设计的同一对引物在不同人的基因组中扩增的片段一定一样吗
如何设计引物超表达基因的全长引物?
scleraxis的基因序列 设计引物
请问我是要提取一段目的基因,后续要表达蛋白,在引物设计中,要在酶切位点后加ATG吗?
我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?
用自己设计的引物pcr目的基因的保守区,总是不成功,大概都有什么原因~
把目的基因连接到质粒上构建重组质粒时该如何选择限制性内切酶?引物如何设计?
为什么在基因克隆中,除开设计PCR引物还要设计表达基因引物?