PCR 引物怎么加保护碱基,一定要按特意序列吗?

PCR时引物的概念包括加进去的酶切位点和保护碱基嘛? 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀? RT-PCR根据什么序列设计引物 pcr引物怎么设计 qRT-PCR检测植物miRNA的表达量,内参基因选择什么最好?可以给出特意反转录引物和qRT-PCR的引物吗? 为什么PCR引物设计中引物可以不从扩增序列两头开始?不从两头开始能得到上下游引物以外的序列吗? 在GENBANK上面查到的线粒体DNA序列,接下来怎么设计PCR引物? 请问在ncbi上blast的时候,需要去除pcr扩增引物序列吗? pcr技术中,引物可以是目的基因核苷酸序列中任意一段吗? 请问PCR一定要两条引物吗?如果我只加一条上游引物,是否可以扩出更长的片断?因为没有下游引物的中止作用了. 想用PCR扩增下面一段序列,急求高手写出上游引物和下游引物.要求上游加EcoRⅠ酶切位点、下游加BamH I酶 请问PCR引物怎么设计