人鼠细胞融合证明细胞的什么特点

人鼠细胞融合证明细胞的什么特点

动物细胞融合　　名称:动物细胞融合
　　主题词或关键词:动物 杂交 生命科学 细胞　　内容　　１９５７年,日本学者冈田善雄在培养动物细胞时加入失去活性的仙台病毒,发现能使两个动物细胞融合,产生具有两个核的细胞.研究表明,很多不同种的动物细胞都能进行融合,形成杂种细胞.如人－鼠、人－兔、人－鸡、人－蛙、鼠－鸡、鼠－兔、鼠－猴等等.细胞融合的具体步骤包括：
　　（１）细胞准备.分贴壁和悬浮细胞两种.前者可直接将两亲本细胞混合培养,后者需制成一定浓度的细胞悬浮液.
　　（２）细胞融合,加促融因子于将行融合的细胞之中,诱导融合.
　　（３）杂种细胞选择.利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而让杂种细胞存活.
　　（４）杂种细胞克隆.对选出的杂种细胞进行克隆（选择与纯化）,经过培养,就能获得所需要的无性繁殖系.
　　植物细胞融合较动物细胞难些.首先,植物细胞外面有细胞壁,因此需要先用纤维素酶去壁,形成原生质体后,才能进行细胞融合.其次,植物细胞融合后形成的杂种细胞,经过培养有可能分化发育成植株,而动物细胞的杂种细胞则缺乏此种能力.植物体细胞融合的过程大致包括：细胞分离,原生质体制备,原生质体融合,杂种细胞筛选及其培养,然后再通过愈伤组织诱导分化出根、茎、叶,最后长成完整的体细胞杂种植株.植物细胞融合技术不仅打破了常规有性杂交育种的亲和性障碍,而且为实现“超远缘杂交”提供了可能,有重大的应用价值.
　　动物细胞融合技术的发展简史
　　19世纪30年代,科学家们相继在肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中观察到多核细胞.19世纪70年代,科学家们在蛙的血细胞中也看到了多核细胞的现象,但是由于受当时科学技术发展水平的限制,人们对这一现象并没有给予足够的重视.1958年,日本科学家岗田用灭活的仙台病毒诱导人的腹水癌细胞融合成功.后来科学家们又成功地诱导了不同种动物的体细胞融合,并且能将杂种细胞培养成活.随着细胞融合技术的不断改进,现在这项技术已经广泛应用于细胞学、遗传学、免疫学、病毒学等多种学科的研究工作中.
　　通过培养和诱导,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合（cell fusion）或细胞杂交（cell hybridization）.
　　基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体（homokaryon）；来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体（heterokaryon）.
　　同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合；异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合.
　　诱导细胞融合的方法有三种：生物方法（病毒）、化学方法（聚乙二醇PEG）、物理方法（离心,震动,电刺激）.某些病毒如：仙台病毒、副流感病毒和新城鸡瘟病毒的被膜中有融合蛋白（fusion protein）,可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合.化学和物理方法可造成膜脂分子排列的改变,去掉作用因素之后,质膜恢复原有的有序结构,在恢复过程中便可诱导相接触的细胞发生融合.
　　细胞融合不仅可用于基础研究,而且还有重要的应用价值,在植物育种方面已经成功的有萝卜+甘蓝、粉蓝烟草+郎氏烟草、番茄+马铃薯等等.而动物细胞融合技术最重要的用途是制备单克隆抗体.　　原理：细胞膜具有流动性