大师作文网【求助】细胞过消化后几天恢复
来源：学生作业帮 编辑：大师作文网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/11/11 08:41:35
【求助】细胞过消化后几天恢复
我是新手,想请教前辈们一个问题.
我用的是SH-EP1细胞株做膜片钳全细胞记录,用0.125的胰酶10s也会消化过头（将培养瓶竖起来细胞就会自动滑落）：（（
我想知道这样的细胞培养几天后用来做膜片钳才合适（从过头的消化中恢复过来）?具体时间不好说,消化细胞,看你胰酶的量,同时看你细胞的生长周期了.
就你上面提到的细胞状态,你也可以试试封接,也许也会成功;
一个熟练的操作者,要根据细胞状态不同,来改变封接的方法;
当然最好的是,非常棒的细胞.
我的细胞很贴壁的,而且铺得非常非常开,不用酶洗不下来的,但一用酶立刻就缩成一团掉下来：（可以减少酶的浓度,这样消化时间会长一点,利于控制,做所有的实验并不是照搬人家的参数,要根据自己的实际情况适当调整参数但我同一批配的胰酶加同样的量每次消化的效果都不一样,细胞密度看起来也都是一样的,但十次中总有3、4次是刚一加入胰酶细胞就迅速成片的缩成一团,形成成百个细胞构成的细胞团,重新贴壁后死很多,郁闷!你减少酶的浓度试试看我都用到 0.0125%了,太夸张了,一定是出了什么问题吧?我看到你的第一个贴,''用0.125的胰酶10s也会消化过头'',到底浓度多少呢?一般消化贴壁细胞用0.25%的胰酶,"胰酶细胞就迅速成片的缩成一团,形成成百个细胞构成的细胞团,重新贴壁后死很多,郁闷!"我建议:消化后加入培养液,离心,去上清液,加入新鲜培养液,吹打为单个细胞再分装培养.那你就3S不就可以了吗,我消化293细胞就是3S,消化3S,然后立即中止,一定要自己根据情况自己掌握消化时间
我用的是SH-EP1细胞株做膜片钳全细胞记录,用0.125的胰酶10s也会消化过头（将培养瓶竖起来细胞就会自动滑落）：（（
我想知道这样的细胞培养几天后用来做膜片钳才合适（从过头的消化中恢复过来）?具体时间不好说,消化细胞,看你胰酶的量,同时看你细胞的生长周期了.
就你上面提到的细胞状态,你也可以试试封接,也许也会成功;
一个熟练的操作者,要根据细胞状态不同,来改变封接的方法;
当然最好的是,非常棒的细胞.
我的细胞很贴壁的,而且铺得非常非常开,不用酶洗不下来的,但一用酶立刻就缩成一团掉下来：（可以减少酶的浓度,这样消化时间会长一点,利于控制,做所有的实验并不是照搬人家的参数,要根据自己的实际情况适当调整参数但我同一批配的胰酶加同样的量每次消化的效果都不一样,细胞密度看起来也都是一样的,但十次中总有3、4次是刚一加入胰酶细胞就迅速成片的缩成一团,形成成百个细胞构成的细胞团,重新贴壁后死很多,郁闷!你减少酶的浓度试试看我都用到 0.0125%了,太夸张了,一定是出了什么问题吧?我看到你的第一个贴,''用0.125的胰酶10s也会消化过头'',到底浓度多少呢?一般消化贴壁细胞用0.25%的胰酶,"胰酶细胞就迅速成片的缩成一团,形成成百个细胞构成的细胞团,重新贴壁后死很多,郁闷!"我建议:消化后加入培养液,离心,去上清液,加入新鲜培养液,吹打为单个细胞再分装培养.那你就3S不就可以了吗,我消化293细胞就是3S,消化3S,然后立即中止,一定要自己根据情况自己掌握消化时间