pcr电泳问题我的pcr出现不正常现象,好几次第一次都没p出东西来 之后我又用第一次p出来的产物再p,终于p出了正常的条

PCR 空白都能P出来 是怎么回事? [菌液PCR,测序,DNA提取,求助]菌液PCR的时候能P出目的条带,为什么测序却完全不正确? 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 pcr时p不出目的基因 怎么办 急 PCR的电泳图,为什么老有这种情况,到底哪方面出了问题呢,我经常做PCR然后就是跑胶,时好时坏,自认为每次的操作都是一样 RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是 PCR产物测序问题.我用简并引物扩增未知基因.设计了几对引物.都出现了目的条带.发现其中两对引物的产物长度比较长.因为我 我是用cDNA作模板的,退火53°第一次跑出来了,目的在150左右,又粗又亮,然后纯化就纯没了,于是再重复P,每一次P的 菌液直接PCR我的pcr体系是50微升的,预变性时间5分钟,模板7微升,我接种单菌落到增菌液,以往都是煮沸了制模板然后p mtDNA进行pcr扩增 25微升体系的电泳结果全部都出想要的一条亮带 但是做了50微升体系的之后跑电泳 许多不出条带 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 嵌套式PCR怎么稀释第二部的产物?我试过2倍、10倍、20倍、30倍、40倍、50倍、100倍,都没有条带.第一次pcr