盐析法口腔拭子快速dna抽取法的实验分析

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/11 22:30:20

盐析法快速提取口腔拭子DNA
朱伟锋罗达亚涂硕张霞丽揭克敏万福生
【摘要】：目的建立盐析法快速从口腔拭子
中提取基因组DNA的方法.方法首先以细胞裂解液和蛋白酶K消化口腔上皮细胞,然后用5 mol/L
NaCl沉淀蛋白质,用异丙醇沉淀DNA,最后用70%乙醇洗涤得到的DNA并将其溶于TE(10mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L
EDTA,pH
8.0)中.用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术对TP53基因的rs1042522和CHRNA3基因的
rs12910984位点进行分型.对不同基因型的样本测序验证.结果单支口腔拭子提取得到的DNA量在0.68～2.56μg之间,D260/D280
比值在1.77～1.94之间.经PCR扩增和酶切消化,10个样本的两个单核苷酸多态性都得到了清楚分型.酶切结果与测序结果吻合.结论本实验所建立的
盐析法可以快速、简便、经济地从口腔拭子得到高质量的基因组DNA.
【作者单位】：
南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室;

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