薄层色谱测头孢氨苄胶囊的步骤?3Q

薄层色谱测头孢氨苄胶囊的步骤?3Q

1 材料和方法 1．1 材料CS-9000双波长飞点快速扫描仪,点样定量毛细管(美国Drummond公司),硅胶G(青岛海洋化工厂),芍药苷(含量测定用,批号：0736—2001I7)、大黄素对照品购自中国药品生物制品鉴定所；中性氧化铝(天津市化学试剂厂),自铺板(1Ocm×lOcm×0.4mm)以2.5g／L羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板,所用试剂均为分析纯.样品来源：本院中草药制剂室生产,60粒／瓶,批号20030701,20030724,20030820.1．2 方法 1．2．1 取本品胶囊2粒,内容物加(6—100)盐酸甲醇lOml,冷浸2h,滤过,滤液蒸干,残渣用甲醇溶解制成lml,作为供试品溶液.另取大黄素对照,加乙醇制成每1ml含lmg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验,吸取上述溶液备3μl,分别点十以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以石油醚(60～90℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)为展开,取出,晾干,置日光下检视.供试品色谱中,在与对照品和对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点.1．2．2 取本品胶囊10粒,加甲醇50ml,加热回流l小时,滤过,滤液蒸干,残渣加蒸馏水3Oml使溶解,用水饱和的正丁醇提取3次,每次30ml,合并正丁醇液,用水洗涤2次,每次30ml,弃去水液,正丁醇液置水浴上蒸干,残渣加甲醇lOml溶解,加于已处理好的中性氧化铝柱(7O目,8g,内径15mm)上,以95％甲醇洗脱,收集洗脱液置水浴土蒸干用甲醇定容军lml,作为供试品溶液.另取芍药甙对照品,加甲醇制成每1ml含lmg的溶液,作为对照品溶液.照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验,吸取上述溶液各2μl,分别点于以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,以氯仿-甲醇-水(65：35：10)的下层溶液为展开剂,分别展开,取出,晾干,喷以20％硫酸乙醇溶液,热风吹至斑点显色清晰.供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点.2 结果 2．1 薄层样品溶液的制备取1．2．2项下作为供试品溶液.精密称取芍药苷标准品1.30mg,用甲醇溶解并定容至lml.备用.2．2 薄层色谱条件的选择层析板：自制2.5g／L羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板(1Ocm×lOcm×0.4mm),100℃活化30min后置干燥器内备用.展开剂：以氯仿-甲醇-水(65：35：10)放置分层的下层溶液.显色剂：香草醛硫酸试液.2．3 样品的含量测定测定条件：对层析后的样品及标准品在400～700nm范围内扫描,二者在580nm处均有最大吸收.因此测定波长λs=580nm,Λr=7OOnm,线性化参数SX=3,双波长反射锯齿法扫描.精密吸取芍药苷标准晶溶液1,2,3,4,5,6,7μ1．点于同一薄层板上,按选定的色谱条件展开后.置薄层扫描仪上测定峰面积积分值,对所得的数据进行分析处理得回归方程为Y=4018.18X+4465.69,相关系数r=O.9994.结果表明：芍药苷点样量1.9.1μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系.精密吸取一定量对照晶溶液及供试品溶液,点于同一薄层板上.按上述条件展开,扫描.(Tab1)将层析后的大黄素样品测定峰面积积分值,每隔15min测定一次,连续测4次.结果lh内稳定,RSD为1.99％.精密吸取供试品溶液3μl,在同一薄层板上点5个相同量的点,依法测定各斑点峰面积积分值,结果RSD为1.93％.精密吸取同批样品一定量,分别点于5块层析板上,依法测定峰面积积分值,结果RSD为2.00％.精密称取已知含量的同批样品适量,准确加入一定量的芍药苷,按供试品溶液的制备方法制备,依法测定大黄素的含量,计算回收率为98.15％,RSD为1.57％(n=3).