动物肝脏研磨而成的匀浆液离心后的结果
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/23 22:33:22
动物肝脏研磨而成的匀浆液离心后的结果
剪碎后加2倍组织冷的0.14mol/lNacl 和0.15mol/l的EDTA溶液后研磨成的匀浆
剪碎后加2倍组织冷的0.14mol/lNacl 和0.15mol/l的EDTA溶液后研磨成的匀浆
DNA提取的实验步骤:
1.取新鲜动物肝,除去结缔组织,用0.14mol/LNaCl-0.15mol/L EDTA溶液洗去血液.在冰浴中切成小块,称取10g,加入两倍体积0.14mol/LNaCl-0.15mol/L EDTA溶液,于研钵中研磨至匀浆,以3000r/min的转速离心10min.
•2.在上述沉淀物中加入0.14mol/LNaCl-0.15mol/L EDTA溶液,使总体积为20mL,然后在60℃下,滴加20%SDS溶液1mL,边加边搅拌,再摇动10min,使核酸与蛋白质分离.
•3.边搅拌边加固体氯化钠2g,使其最终浓度达到l.4mol/L,再摇10min.
•4.加等体积的氯仿一异戊醇,轻混,静置,离心管内的物质分为三层,上层为含DNA的水相层,下层为氯仿一异成醇混合物,中间层为变性蛋白凝胶.吸出上清液,倒入另一离心管.
•5.加1/2体积的氯仿一异戊醇混合液,振摇20min,以3000r/min的转速离心10min.
•6.吸出上清液,加入2倍体积95%乙醇溶液(预冷),产生沉淀.
·①用玻棒搅拌,DNA的丝状物即缠在玻棒上,用80%乙醇溶液洗涤一次.
·②再以4000r/min的转速离心溶液10min,弃去上清液,沉淀用80%乙醇溶液再离心洗涤一次.
•7.将沉淀置于吸水纸上,除尽乙醇,室温自然干燥后,加入1ml 蒸馏水,使DNA充分溶解,待用.
核酸提取过程中的注意事项:
(1)避免过酸过碱或高温环境,合适的T:0-4℃,
pH4-9;
(2)防止机械力的切割作用,避免剧烈振荡;
(3)防止核酸酶的降解作用,可加入抑制剂-EDTA,柠檬酸钠;
(4)整个操作步骤应尽量简化,缩短实验过程,减少核酸变性、降解、机械切割的机会.
得到的是DNA粗提取液.
1.取新鲜动物肝,除去结缔组织,用0.14mol/LNaCl-0.15mol/L EDTA溶液洗去血液.在冰浴中切成小块,称取10g,加入两倍体积0.14mol/LNaCl-0.15mol/L EDTA溶液,于研钵中研磨至匀浆,以3000r/min的转速离心10min.
•2.在上述沉淀物中加入0.14mol/LNaCl-0.15mol/L EDTA溶液,使总体积为20mL,然后在60℃下,滴加20%SDS溶液1mL,边加边搅拌,再摇动10min,使核酸与蛋白质分离.
•3.边搅拌边加固体氯化钠2g,使其最终浓度达到l.4mol/L,再摇10min.
•4.加等体积的氯仿一异戊醇,轻混,静置,离心管内的物质分为三层,上层为含DNA的水相层,下层为氯仿一异成醇混合物,中间层为变性蛋白凝胶.吸出上清液,倒入另一离心管.
•5.加1/2体积的氯仿一异戊醇混合液,振摇20min,以3000r/min的转速离心10min.
•6.吸出上清液,加入2倍体积95%乙醇溶液(预冷),产生沉淀.
·①用玻棒搅拌,DNA的丝状物即缠在玻棒上,用80%乙醇溶液洗涤一次.
·②再以4000r/min的转速离心溶液10min,弃去上清液,沉淀用80%乙醇溶液再离心洗涤一次.
•7.将沉淀置于吸水纸上,除尽乙醇,室温自然干燥后,加入1ml 蒸馏水,使DNA充分溶解,待用.
核酸提取过程中的注意事项:
(1)避免过酸过碱或高温环境,合适的T:0-4℃,
pH4-9;
(2)防止机械力的切割作用,避免剧烈振荡;
(3)防止核酸酶的降解作用,可加入抑制剂-EDTA,柠檬酸钠;
(4)整个操作步骤应尽量简化,缩短实验过程,减少核酸变性、降解、机械切割的机会.
得到的是DNA粗提取液.
研磨酵母菌后离心处理将酵母菌研磨成匀浆,离心后得上清液(细胞质基质)和沉淀物(含线粒体),把等量的上清液、沉淀物和未曾离
将酵母菌研磨成匀浆,离心后得上清液(细胞质基质)和沉淀物(含线粒体)
将酵母菌研磨,离心分离后,得到上清液(含细胞质基质)和沉淀物(含细胞器),把等量的上清液、沉淀物和未经离心的匀浆分别放入
在DNA的粗提取中,为什么动物细胞只需要加水涨破,而肝脏细胞却需要研磨?肝脏细胞不也是动物细胞吗?
动物肝脏细胞和血细胞中过氧化氢酶的浓度很高,使用前要将新鲜的动物肝脏制成匀浆,以释放肝脏细胞中的------------
新鲜的肝脏研磨液为什么会有过氧化氢酶
为什么要使用新鲜的肝脏研磨液?
请问将肝脏制成研磨液过氧化氢酶是否会被破坏?过氧化氢存在于肝脏的哪里?
关于动物的肝脏?
在“比较过氧化氢在不同条件下的分解”实验中,FeCl3溶液和肝脏研磨液都属于实验的____变量,而_________则是
铁离子可以作为过氧化氢酶的无机催化剂,新鲜的肝脏研磨液中含有过氧化氢酶
探究酶的高效性时,为什么要将肝脏制成研磨液?