用Ni sepharose 6 fast flow纯化His-tag 蛋白,Elution buffer中含有500mM

蛋白纯化过程中,lysis buffer,wash buffer和Elution buffer所含的咪唑的作用 最近拿镍柱做实验,可纯化不到His-tag融合蛋白, 怎么溶解EDTA我用镍柱纯化his融合蛋白后,要把镍柱重新挂柱.然后stripping buffer 需要50mM的ED Dna胶回收实验中 binding buffer ,wash solution ,elution buffer的作用分别 请问Elution Buffer（10 mM Tris-Cl pH8.5 )怎么配? 为什么用带HIS标签的镍柱纯化试剂盒纯化蛋白后包ELISA可以避免大肠杆菌的干扰 带HIS蛋白用镍柱纯化后的保存问题 gst融合蛋白是什么?和His-tag融合蛋白有什么区别么? 经初步纯化后的蛋白质样品,如果用层析法检测显示只有一个峰,是否可以认为该纯化样品只含有一种蛋白? pcr已纯化是点鉴定胶吗?用几*的loading buffer?跑几分钟? pMAL系列表达的蛋白用什么纯化柱纯化最好? 我loading buffer直接加到PCR产物中了,不知道影不影响PCR产物直接纯化