感受态细胞制备时对菌体细胞的浓度大小有要求吗,是不是越大越好呢
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/21 05:46:01
感受态细胞制备时对菌体细胞的浓度大小有要求吗,是不是越大越好呢
不是.虽然菌体浓度越大,细胞的绝对数量越多,但这只是在一定的范围内,感受态的效率主要和菌体的状态有关.
制作感受态的菌体最好处于对数期,温度不同,处于对数期的OD值也不同,一般37℃摇菌,制作感受态的OD最好在0.4左右,不要超过0.6.
再问: 谢谢您的答复。我是想请教一下在保证制作感受态的菌体处于对数期的前提下,对其浓度有要求吗?也就是说我需要怎样将对数期的菌体浓缩,浓缩至什么样的程度才可以,是否越浓越好呢
再答: 在保证制作感受态的菌体处于对数期的前提下,你可以适当地对其进行浓缩,增加感受态的绝对数量以增加转化效率,可是这样做出来的感受态的数量就减少了,而且菌体浓度太大,你用试剂悬浮的时候会很难。你自己取个适合的值吧。 关于怎样浓缩,不同的方法制作过程也不同,你可以去搜一下钙处理法、Inoue法、Nishimura法、RbCl法以及一步法,参考一下。 制作时全程低温很重要。
制作感受态的菌体最好处于对数期,温度不同,处于对数期的OD值也不同,一般37℃摇菌,制作感受态的OD最好在0.4左右,不要超过0.6.
再问: 谢谢您的答复。我是想请教一下在保证制作感受态的菌体处于对数期的前提下,对其浓度有要求吗?也就是说我需要怎样将对数期的菌体浓缩,浓缩至什么样的程度才可以,是否越浓越好呢
再答: 在保证制作感受态的菌体处于对数期的前提下,你可以适当地对其进行浓缩,增加感受态的绝对数量以增加转化效率,可是这样做出来的感受态的数量就减少了,而且菌体浓度太大,你用试剂悬浮的时候会很难。你自己取个适合的值吧。 关于怎样浓缩,不同的方法制作过程也不同,你可以去搜一下钙处理法、Inoue法、Nishimura法、RbCl法以及一步法,参考一下。 制作时全程低温很重要。
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