构建的质粒,菌液PCR正确,质粒电泳却什么都没有,是怎么回事?

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/13 01:49:31

构建的质粒,菌液PCR正确,质粒电泳却什么都没有,是怎么回事?
我要将一个片段连接到载体上,片段长度：2588bp,载体：2686bp,是平末端链接,4度过夜,然后转化DH5a,蓝白筛选,用菌液PCR验证,引物用的是原来扩增片段的引物,扩出来的条带与阳性对照相同,应该就是正确的了,但是我提取质粒电泳却什么都没有,用质粒当模板PCR也没有扩出来,但是却可以测到有浓度,40ng/ul,跑了几次电泳都没有,这让我很是费解,

40太低了,质粒小抽一般能够达到200ng/ul左右,40ng/ul的浓度去跑电泳当然看不出来的啊.
再问：我之前提取的质粒浓度差不多也是这样都能跑出来

单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀为什么我的目的基因连接克隆载体转化、提质粒后,酶切鉴定正确,而质粒PCR和菌液PCR鉴定都不正确呢?着急 PCR后的质粒DNA电泳的泳道上有一长段白色印迹荧光定量pcr做荧光定量pcr的绝对定量时为什么要构建标准质粒,利用质粒构建标准曲线,为什么不直接用DNA模板构建标准曲 PCR之后电泳没有条带,连引物二聚体都没有?这是怎么回事了? 英语翻译本文通过PCR、转化、提质粒、酶切、连主要接、纯化等步骤构建了质粒pET28a-NULP1.先通过PCR扩增出了基因工程构建基因表达载体用到质粒的原因质粒构建的过程中,如果是想把α基因与A质粒重组,但为什么要先与一个B质粒先重组再构建呢? 有别人构建好的含有目的基因的表达载体质粒,但是只知道目的基因的mRNA序列,如何做PCR检测目的基因? 质粒DNA电泳图与基因组DNA电泳图有什么区别? 菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么? 质粒和Ti质粒有什么不同?