我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/13 07:53:25

我要扩增一个基因GC含量较高,我想用GC buffer试试
现在用的是master mix 酶,buffer是否能与master mix 酶同用?

我没做过这个,给点自己知道的信息,不知道能不能帮上：）mix应该是由buffer、酶、dNTP和镁离子（、水）吧?你要是要加这个GC buffer就是有两份buffer,如果总体积不变的话,可能最大的问题是缓冲液中各离子浓度的问题.我不知道mix里的buffer以及GC buffer的成分是什么样的,如果大多数成分相同,就可能会导致缓冲液浓度过高,如果两者完全不同的话,或许还能做这个实验.假如反应体系总体积变化的话,热动力学又会完全不同,而且还要调整这两者的用量.
我觉得最好是单独使用GC buffer、酶、dNTP和镁离子,然后略提高退火温度、略延长解链时间（但不能太长,否则酶的活力会降低）.

PCR 引物设计,在扩增一个基因片段,1200bp左右,编码区1000个bp左右.由于上游引物GC含量高,我想分两段扩增 GC buffer扩增出来的PCR产物可以用DHPLC进行突变检测吗在DGGE实验中,胶回收后要测序前的PCR扩增时引物必须为不带GC夹子的吗?我用带GC夹子 GC是什么,为什么要GC 高GC基因的荧光定量能不能加DMSO 追问引物设计第一次PCR的产物胶回收后用纯化吗,还是可以直接当做底物?目的基因3‘端GC含量太高,导致上下游引物Tm值差 pcr 一段2000多bp的基因引物设计时条件怎么设包括引物长度 gc含量等因为我用软件设计时总是设不出来可以 perl分析基因序列就是给出一个.fa类型的文件,找出其中的N长度,GC长度,GC比例等信息. ...AC ...GC GC是什么意思? gc是什么意思 >99.0% >99.0% (GC),这是个含量单位,我想问下,>99.0% (T),这两者有什么区别啊?