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请设计试验,利用基因工程手段表达并分离小鼠免疫球蛋白.

来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/06 13:57:45
请设计试验,利用基因工程手段表达并分离小鼠免疫球蛋白.
请设计试验,利用基因工程手段表达并分离小鼠免疫球蛋白.
1、提小鼠基因组DNA,设计引物进行PCR.将产物连接到载体上,转化涂平板挑单菌落后摇菌,进行菌液PCR,测序证实为目标序列后进行后续实验.
2、从菌液中提取质粒,经双酶切回收目的片段,与经同样酶切的原核表达载体连接,再经酶切鉴定及序列分析证实已成功构建融合表达载体.
3、将重组原核表达载体转化入大肠杆菌,用SDS-PAGE处理后免疫球蛋白主要以可溶性形式存在于上清液中,收集上清液,分离纯化,后用洗脱液洗脱目的蛋白,透析除盐得到较高纯度的目的蛋白.