关于酵母菌摇床培养被细菌污染的问题?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/11/11 01:00:06
关于酵母菌摇床培养被细菌污染的问题?
我们生产酵母菌,原来用四层绒布封口1000ml的三角瓶(里面装250ml豆芽汁培养基),摇床培养3天,做了一个ck,不加任何菌.3天过后涂平板ck里面细菌在千万级左右,酵母菌中也有细菌.后来在培养基里面加氯霉素,细菌与酵母菌的比值在1:1000左右或以下,但酵母菌大量减少从5-10亿/ml到1-2亿/ml.最后老板买来了硅胶塞,我在实验室下做了2次实验,空白对照有:不加任何菌的带硅胶塞的三角瓶(ck0),加酵母带绒布的三角瓶(ck1,ck2,ck3);实验组:加酵母带硅胶塞的三角瓶(1,2,3)(酵母菌有3种,每个接一个三角瓶).同等条件下培养3天,后涂平板用不加氯霉素的PDA培养基检测.检测结果:ck0(稀释一个次方):无任何菌生长;ck1,ck2,ck3:酵母菌在5亿/ml以上,细菌在500万左右;实验组1,2,3:只有酵母菌,酵母菌数2亿/ml左右.后来我们在摇床上培养酵母,接了20个三角瓶用硅胶塞.3天过后,将20个三角瓶的酵母菌液混在一起,用牛肉膏蛋白胨涂平板检测细菌在1000万以上.现在就是不知道这是怎么回事?硅胶塞应该可以阻止细菌进入三角瓶.但是那些细菌从哪儿来的呢?我前期做的2次实验用硅胶塞的都没有细菌(每次只接了3瓶),为什么接20瓶后就有了细菌呢?
我们生产酵母菌,原来用四层绒布封口1000ml的三角瓶(里面装250ml豆芽汁培养基),摇床培养3天,做了一个ck,不加任何菌.3天过后涂平板ck里面细菌在千万级左右,酵母菌中也有细菌.后来在培养基里面加氯霉素,细菌与酵母菌的比值在1:1000左右或以下,但酵母菌大量减少从5-10亿/ml到1-2亿/ml.最后老板买来了硅胶塞,我在实验室下做了2次实验,空白对照有:不加任何菌的带硅胶塞的三角瓶(ck0),加酵母带绒布的三角瓶(ck1,ck2,ck3);实验组:加酵母带硅胶塞的三角瓶(1,2,3)(酵母菌有3种,每个接一个三角瓶).同等条件下培养3天,后涂平板用不加氯霉素的PDA培养基检测.检测结果:ck0(稀释一个次方):无任何菌生长;ck1,ck2,ck3:酵母菌在5亿/ml以上,细菌在500万左右;实验组1,2,3:只有酵母菌,酵母菌数2亿/ml左右.后来我们在摇床上培养酵母,接了20个三角瓶用硅胶塞.3天过后,将20个三角瓶的酵母菌液混在一起,用牛肉膏蛋白胨涂平板检测细菌在1000万以上.现在就是不知道这是怎么回事?硅胶塞应该可以阻止细菌进入三角瓶.但是那些细菌从哪儿来的呢?我前期做的2次实验用硅胶塞的都没有细菌(每次只接了3瓶),为什么接20瓶后就有了细菌呢?
1、四层绒布封口是不够的,而且绒布吸水,在灭菌或者摇床的时候可能会沾上液体,成为细菌通过的通道.你一定要用绒布的话,可以在里面加棉花塞,要未脱脂的棉花.
2、3瓶不染菌不代表20瓶也不会染菌.举例:假设用硅胶塞时染菌率是4%,那么你实验的3瓶都不染菌的几率大约是90%;如果你做20瓶的话,不染菌的几率只有45%左右.所以做3瓶不染菌,而做20瓶却染菌了是很正常的.
2、3瓶不染菌不代表20瓶也不会染菌.举例:假设用硅胶塞时染菌率是4%,那么你实验的3瓶都不染菌的几率大约是90%;如果你做20瓶的话,不染菌的几率只有45%左右.所以做3瓶不染菌,而做20瓶却染菌了是很正常的.
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