酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/24 23:23:35
酶切后PCR一条带都没有 但原质粒PCR有条带 为什么
做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶切产物同时跑电泳鉴定 原质粒有条带 可是酶切一条也没有 为什么
做MUCIN基因 从扩增、 切胶纯化、 加A 、T载体链接、 转入感受态 到挑克隆鉴定出阳性克隆 最后提质粒 取一部分提出的质粒双酶切 质粒与酶切产物同时跑电泳鉴定 原质粒有条带 可是酶切一条也没有 为什么
什么酶呢?最后酶切组的电泳条带是弥散,是只有质粒条带没有酶切产物条带,还是干脆就是空白?
如果是弥散,最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格,因为掌握不当而产生了星号活性,导致把质粒切碎了.建议查一下所用酶的酶切条件.
如果是有质粒条带而没有短片段条带,也就是说没切开了.可能酶切位点发生了突变,也可能是酶失活了.
如果是空白...我也不知道怎么回事儿了...再重复一次吧.
如果认为之前的步骤都没什么问题,不如直接送测序.比酶切检验还要精确呢.
祝实验顺利.
如果是弥散,最有可能的是所用的酶的反应条件要求比较严格,因为掌握不当而产生了星号活性,导致把质粒切碎了.建议查一下所用酶的酶切条件.
如果是有质粒条带而没有短片段条带,也就是说没切开了.可能酶切位点发生了突变,也可能是酶失活了.
如果是空白...我也不知道怎么回事儿了...再重复一次吧.
如果认为之前的步骤都没什么问题,不如直接送测序.比酶切检验还要精确呢.
祝实验顺利.
单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀
【求助】菌落PCR有目的条带与菌液PCR却什么都没有?
转化后菌液pcr有目的条带,然后提质粒和双酶切验证.但是没有得到目的条带.
PCR电泳,为什么没有条带啊?
菌液pcr可以拉出目的条带,但是质粒抽出来酶切结果说是没有插进去,为什么?
做PCR以后,跑电泳.结果一条带都没有,为什么
PCR跑电泳每次都有条带但都不亮怎么找原因?
PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么
DNA PCR扩增我想问DNA样品检测中有很亮的特异性条带,但为什么经过PCR扩增却是什么都没有那,试过好多条件都没成功
PCR有扩出来条带,但目的条带不是太亮就有什么原因
RAPD反应,DNA检测有条带,PCR没有条带,请问谁知道原因啊?
PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带