用吸收紫外线法定量测定核酸?

来源：学生作业帮编辑：大师作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/12 02:01:36

用吸收紫外线法定量测定核酸?

平时用紫外吸收法进行估算很是方便快捷
1) 浓度估算
RNA浓度＝ 40 X A260 (mg/L)
也就是说如果你配的RNA溶液在260nm处吸收(A或OD)为1,则这个溶液的浓度为：
1X40＝40mg/L
至于摩尔浓度就要你自己根据序列用软件计算分子量后决定了
注意浓度和紫外吸收的线型范围,我一般是稀释自己的样品使得吸收在0.1之间
这也同样可以用于DNA浓度的估算
双链DNA浓度＝50 X A260 (mg/L)
单链DNA浓度＝33 X A260 (mg/L)
2）纯度
测同一样品在260nm和280nm吸收的比值
对于纯RNA,A260/A280约为2
对于纯DNA,A260/A280约为1.8
如果比值小于1.7,则很有可能样品被蛋白质或酚类物质污染了.
但是这个方法无法判定RNA和DNA相互污染的情况.

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