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分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢?

来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/22 18:35:04
分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢?
分子克隆的时候,提出的质粒用菌落PCR是阳性的,但是酶切鉴定的时候却没有切出来目的条带,是怎么回事呢?
空质粒做过PCR么?是否阳性?
再问: 空质粒做PCR的时候,没有条带啊。。载体是单酶切的。
再答: 单酶切了以后大小不对么?
再问: 嗯,酶切鉴定的时候,条带大小不对,片段没有插到载体里面。呵呵。。谢谢你啊!
再答: 我刚注意到,你用的是菌落PCR。这个比较容易受污染,未转化进入细胞的连接产物等也可能作为模板使PCR结果呈阳性。酶切结果不对,那就不对了。