【求助】问一个关于质粒的基础问题
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/15 19:01:00
【求助】问一个关于质粒的基础问题
刚刚开始做实验 请教一个关于质粒比较基础的问题,质粒转染细胞后,是同细胞内的基因相融合后表达还是仍以质粒的环形形式存在表达?每个转染细胞内转染进入的质粒数量是怎么样的啊?这个数量和蛋白表达多少有没有关系?还有个问题是请问现在最常用的质粒转染技术是什么?
菜鸟级的问题,请大家积极帮忙,多谢!
刚刚开始做实验 请教一个关于质粒比较基础的问题,质粒转染细胞后,是同细胞内的基因相融合后表达还是仍以质粒的环形形式存在表达?每个转染细胞内转染进入的质粒数量是怎么样的啊?这个数量和蛋白表达多少有没有关系?还有个问题是请问现在最常用的质粒转染技术是什么?
菜鸟级的问题,请大家积极帮忙,多谢!
质粒进入细菌叫转化,别让师兄笑话你.
做实验用的质粒基本都是基因工程改造的,所以已经失去整合到染色体(现在把细菌的总DNA也叫做染色体)的能力,是独立存在的,而且因为线性的质粒无法完整复制,所以只有环状的质粒才能稳定遗传.
“每个转染细胞内转染进入的质粒数量是怎么样的啊?”问题不明了.如果是指转化过程,则不必关心这个问题.如果是指进入细菌后的数量,则与质粒复制能力有关.常用的松弛型质粒很多,而严谨型的少.如果失去抗生素的选择压力,质粒数量会很快减少.
质粒数量当然与蛋白表达有关,但有的启动子可以被调控,需要该基因表达时加诱导剂,则该蛋白开始大量表达.
转化方法:氯化钙法是最便宜的常用的.电转化效率更高.
做实验用的质粒基本都是基因工程改造的,所以已经失去整合到染色体(现在把细菌的总DNA也叫做染色体)的能力,是独立存在的,而且因为线性的质粒无法完整复制,所以只有环状的质粒才能稳定遗传.
“每个转染细胞内转染进入的质粒数量是怎么样的啊?”问题不明了.如果是指转化过程,则不必关心这个问题.如果是指进入细菌后的数量,则与质粒复制能力有关.常用的松弛型质粒很多,而严谨型的少.如果失去抗生素的选择压力,质粒数量会很快减少.
质粒数量当然与蛋白表达有关,但有的启动子可以被调控,需要该基因表达时加诱导剂,则该蛋白开始大量表达.
转化方法:氯化钙法是最便宜的常用的.电转化效率更高.