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重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一

来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/10/05 01:16:16
重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一
PCR扩增出1kb的带,双酶切(3h)切出的是2kb的带,和载体相比,切出的带不亮,有的根本看不清,可能是目的片段不浓,如果是质粒不纯,我是从单菌落来的.
重组质粒双酶切带与PCR扩增带大小不一
大小不一是差多少?你PCR扩增出来的时候是多长?双酶切出来是多长?
你最好先把重组质粒单酶切看一下,有可能是你的质粒不纯,混了别的质粒;另外,用软件再检查一下你的质粒序列,不要别的位置上有双酶切可以切开的位点;还有,你酶切时间多长?可以过夜切一下试试看
你转化质粒到菌里去之后,有没有用PCR的方法去做菌落或者质粒的鉴定?你1KB的带,酶切鉴定出来2KB,说明质粒肯定不对的嘛,或者还有一个可能你把MARK长度记错了