如何制备用于蓝白筛选的培养基?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/30 06:21:37
如何制备用于蓝白筛选的培养基?
首先配置普通的培养基(LB或者SOB,SOC),然后高压灭菌后,让培养基冷却到60度左右,加入合适的抗生素(AMP等),接着倒平板.然后配置(20mg/ml)的X-gal(用二甲基甲酰胺溶解)和200mg/ml的IPTG(水溶).在做蓝白筛选前,在平板上加入40ul的X-gal和4ul的IPTG(注意顺序,IPTG加在X-gal液滴上),然后用玻璃棒均匀涂开,稍微干下后就可以涂转化的感受态细胞了,板子最好是现涂现用,虽然可以在四度冰箱中存一周左右,但会降低效果.X-gal易见光分解,不用灭菌储存在-20冰箱.IPTG配置储存液的时候需要过滤菌膜后才能使用.
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