sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/22 10:03:14
sds-page 跑了n次.marker条带清晰,但是样品没有条带.这是怎么回事啊?
跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.
主要是我看分离胶里没有蛋白,我就想会不会在浓缩胶里。所以给浓缩胶也一起染色的。上样缓冲液用的是2倍的买的蛋白marker上说明书上说的那个配方。用的就是20UL蛋白提取液20ul的上样缓冲液。
跑了n次了.用考马斯亮蓝测了样品中是有蛋白含量的.但是跑完后在浓缩胶中也没有条带.
主要是我看分离胶里没有蛋白,我就想会不会在浓缩胶里。所以给浓缩胶也一起染色的。上样缓冲液用的是2倍的买的蛋白marker上说明书上说的那个配方。用的就是20UL蛋白提取液20ul的上样缓冲液。
首先,我建议你到丁香园或者说中国生命科学论坛发帖求助,能更快得到答案.
其次,你的问题说的不太清楚.譬如说你测得的蛋白浓度是多少呢?你有跟BSA标准曲线比对一下么?会不会是蛋白浓度太低需要浓缩呢?也有可能说你的分离胶和浓缩胶的浓度不适合你的蛋白.另外你跑的是什么蛋白呢?是比较纯的蛋白还是全蛋白呢?如果说全蛋白的话没有条带,又有可能是你样品处理的问题了.有可能的话发张图上来帮你看看.
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能否说下你的蛋白样品是如何处理的?是用什么办法提取的蛋白?
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看了楼下说的,我觉得你说的确实有问题,按说浓缩胶里是不会有蛋白条带的,我染色也从来都是把浓缩胶去掉的.应该是染色分离胶啊.看了你提取蛋白的步骤,我觉得也没有什么问题吧,你样品是怎么处理之后点样的?加1/4体积的5倍loading buffer么?
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实在是看不出来问题所在.有空把你的图发到我邮箱 我想看看你的图.
tanzhen613@163.com
其次,你的问题说的不太清楚.譬如说你测得的蛋白浓度是多少呢?你有跟BSA标准曲线比对一下么?会不会是蛋白浓度太低需要浓缩呢?也有可能说你的分离胶和浓缩胶的浓度不适合你的蛋白.另外你跑的是什么蛋白呢?是比较纯的蛋白还是全蛋白呢?如果说全蛋白的话没有条带,又有可能是你样品处理的问题了.有可能的话发张图上来帮你看看.
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能否说下你的蛋白样品是如何处理的?是用什么办法提取的蛋白?
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看了楼下说的,我觉得你说的确实有问题,按说浓缩胶里是不会有蛋白条带的,我染色也从来都是把浓缩胶去掉的.应该是染色分离胶啊.看了你提取蛋白的步骤,我觉得也没有什么问题吧,你样品是怎么处理之后点样的?加1/4体积的5倍loading buffer么?
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实在是看不出来问题所在.有空把你的图发到我邮箱 我想看看你的图.
tanzhen613@163.com
sds-page电泳时蛋白样品没有跑出条带,
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上条带都没有了
我初学蛋白质电泳试验,对这张蛋白质电泳图不知怎样看,分析?请问图中MARKer的每条带的数值是多少?SDS PAGE蛋白
蛋白纯化的问题我是用镍柱纯化的蛋白 非自然条件下的 包涵体的 但是跑sds-page没有条带或者是很不清楚,今天跑的什么
我跑出来的PCR目的条带很清晰,但是marker很暗,每个加样孔都一样的暗
PCR之后电泳没有条带,连引物二聚体都没有?这是怎么回事了?
CTAB法提取水果DNA时,可以看到清晰的RNA条带,但是DNA没有条带,为什么?
Western blot实验电泳时 Marker条带不清晰,很弥散,无法辨别有几条带,请问什么原因可以导致啊?
为什么我做Western,电泳时预染Marker很值条带也很清晰,但是转膜后膜上的预染Marker就变的很歪,非常歪.并
PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常.
跑SDS-PAGE电泳,加热变性的,我知道样品要加loading buffer,marker中加不加loading bu
在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊?