大师作文网什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)?
来源：学生作业帮 编辑：大师作文网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/11 23:20:58
什么是凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)?
回答者：匿名用户 时间:2009-03-05 去哪里找最出色的生命科学学术交流论坛?>>> 凝胶迁移或电泳迁移率实验（EMSA-electrophoretic mobility shift assay）是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析.这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用.通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针.DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢.同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链.当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液.在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液.竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段（特异）,和其它非相关的片段（非特异）,来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性.在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合.