有一个最基本的PCR问题没有明白,引物到底是如何和模板链结合的
来源:学生作业帮 编辑:大师作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/09 14:21:36
有一个最基本的PCR问题没有明白,引物到底是如何和模板链结合的
第一次自己进行引物设计,对于一个基本问题有点迷惑了,引物是如何结合模板的,有人说是上游引物和模板链的5‘端序列相同,下游引物则是与模板链互补,我之前一直以为是两个引物都是该和模板链互补,然后再扩增出中间一段.那如果上游引物和模板链相同,那怎么连接呢,望得到解答,
第一次自己进行引物设计,对于一个基本问题有点迷惑了,引物是如何结合模板的,有人说是上游引物和模板链的5‘端序列相同,下游引物则是与模板链互补,我之前一直以为是两个引物都是该和模板链互补,然后再扩增出中间一段.那如果上游引物和模板链相同,那怎么连接呢,望得到解答,
首先你要明白,DNA合成需要引物3'端的羟基,合成方向是5‘-3’.
如果非要指明模版链和互补链,那么上游引物是和互补链3‘配对,这样合成方向才是5’-3‘
而下游引物和模版的3’端互补配对,合成方向5-3‘
结果是,一个模版复制出2个子代,引物之间的序列是相同的,半保留复制,母代的DNA双链被分开.理论上类似裂变反应,所以PCR才能在30-40循环后将微量的序列放大百万倍
如果非要指明模版链和互补链,那么上游引物是和互补链3‘配对,这样合成方向才是5’-3‘
而下游引物和模版的3’端互补配对,合成方向5-3‘
结果是,一个模版复制出2个子代,引物之间的序列是相同的,半保留复制,母代的DNA双链被分开.理论上类似裂变反应,所以PCR才能在30-40循环后将微量的序列放大百万倍
PCR引物设计中,引物上是否需要每个碱基都与模板链结合?
PCR引物的问题PCR时,单引物可以扩增模板吗?
pcr引物设计是根据原基因的编码链 还是模板链 有关系嘛
pcr技术中的引物是怎么来的?得到的dna分子有没有引物
PCR说法不正确的是 A PCR的基本步骤为变性退火延伸B也需要模板DNA RNA C DNA聚合酶参加 D不需要引物
PCR扩增目标基因,完全没有条带.是不是设计的引物太短?引物只有10个碱基和模板配对
谁能通俗易懂的给我解释一下PCR反应过程中,引物与模板如何结合?扩增出来的是上下游引物之间的片段呢?
请问在PCR实验中,如果不知道模板DNA的核酸序列的情况下如何设计PCR引物?
用昆虫总DNA跑PCR,引物用的是cytb,测序出现杂合问题,请问是什么原因?最好能有经验之谈.
不知序列的DNA模板PCR引物的设计
PCR中引物是什么时候合成的?是模板DNA在高温下解旋后吗?不好意思,没有多少财富值了,请知道的告诉我下
实时定量PCR 引物设计的问题,