在琼脂糖凝胶电泳中为什么50bp的Marker跑不出来?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/08 08:29:34
你给的信息的确很少了.楼上2位都分析的很好,不过,我补充说一下露姬雅关于质粒三条带的解释.现在对于3条带的解释是这样的:最前面跑最快的是超螺旋,质粒是超螺旋的,你电泳的时候最亮很正常;中间的是开环质粒
主要的原因是保持琼脂凝胶和周围的缓冲体系保持相同的pH值,当然这种pH值是前人优化过的,最有利于核酸分离和稳定的pH条件;如果凝胶和缓冲体系的pH存在较大的差异,势必会影响核酸的分离效果.
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而
1、DNA的分子大小及构型不同构型DNA的移动速度次序为:供价闭环DNA(covalentlyclosedcircular,cccDNA)>直线DNA>开环的双链环状DNA.线状双链DNA分子在一定浓
用来鉴定DNA片段(单位是kDa)的大小的.maker是预制的含有标准片段长度DNA的混合物,在琼脂胶中不同的长度的片段跑的距离不同,通过比较用以初步确定样品中DNA片段的大小.如下图,最左边的是Ma
RNA跟DNA不一样,主要现象就是降解1.提取过程中RNA出现降解2.洗脱的时候洗掉了3.18S有部分降解4.弥散带说明降解严重,杂质过多5.28S部分降解RNA完美提出来的话应该是三条带:28,18
RNA分子有很多二级结构,需经变性剂处理,而DNA一般不需要变性处理RNA电泳的电泳槽及缓冲液均需要确保无RNAase,有RNAase抑制剂处理过;而DNA相应的则需要DNAase抑制剂处理所用的缓冲
根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标
如果你能确定样品没问题,(没有跑半路自动降解等问题),那么可能是下列情况.1:胶没配好,不均匀,所以浓度高的地方跑的慢,低的跑得快,成月牙形或者别的形状.解决办法,配的时候小心点.2:电泳槽出毛病了,
实验有没有跑标准分子量DNAMarker?如果Marker电泳后条带正常,那么就是PCR无扩增条带;如果Marker也看不见,那就是配胶有问题,或者配胶用的试剂(比如染料)有问题
琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分离范围参数:凝胶浓度(%)线性DNA长度(bp)0.51000~300000.7800~120001.0500~100001.2400~70001.5200~30002.0
点完样再加缓冲液,样品会被冲出来,另外不加缓冲液就拔梳子,孔道容易变形,不规则,
我硕士专业是分子生物学这方面的,我可以很负责地告诉你,质粒DNA分子具有三种构型:共价闭合环开DNA(cccDNA,SC构型)、开环DNA(OC构型)和线性分子(L构型).在细菌体内,质粒DNA是以负
琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段
发个照片看看.
1.trylowyouragaroseconcentration,say,to0.8%.2.heatyourPCRmixat60Cfor5minutesbeforeloadingit.3.whenyo
先回答楼下提取质粒时可能会残留乙醇.乙醇比缓冲液轻,如果样品有乙醇,你点样时乙醇就把样品带出来了.
可能性太多了.1.你跑胶一般都要放MARKER或者叫DNALADDER吧,这个MARKER除外对DNA标记大小以外,还可以用来监控ELECTROPHORESIS的质量,如果MARKER显示而DNA没显
Ethidiumbromideisanintercalatingagent,whenexposedtoultravioletlight,itwillfluorescewithanorangecolou
greenview没用过,只用过EB.我不在甲醛胶里加EB,好像那样背景比较高.我都是在变性RNA时在RNA loading buffer里加EB,胶上没什么背景.你先试一下看看吧